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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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Arsene_Lupin

铜虫 (小有名气)

[求助] 耐盐碱菌全蛋白跑2D

最近在学习双向电泳技术,帮老师跑蛋白。最近拿到一株耐盐碱菌株,提取总蛋白后跑2D(GE),3-10,18cm胶条,正常电聚焦后胶条不是应该从溴酚蓝色变成无色么,可是这几个样阳性端是无色,阴性端还是蓝色,且胶条厚度明显看出蓝色端厚于白色端,老师的几个样品完全变成无色。请教各位虫友可能的原因及解决之道。(此菌之前培养条件是10%Nacl,pH10)

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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
8楼: Originally posted by Arsene_Lupin at 2013-05-19 05:21:10
这就是问题所在了,我提的是总蛋白,虽说耐盐菌会有些pI很高的蛋白但不至于一个点都没有吧,正常蛋白是不是也可以在胶条上分开?如果一些蛋白pI很高,超过胶条范围,不也应该跑到胶条的端点么?二向反映出来在端位 ...

水化时样品的体积不宜超过水化液的1/10,否则会影响水化效果。如果样品太稀的话可以先沉淀蛋白样品后直接用水化液溶解样品。此外如果样品集中在pI较高的范围,你可以试试换一下胶条的pH范围。
9楼2013-05-19 12:16:27
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Arsene_Lupin

铜虫 (小有名气)

木有人回复呢!顶起来!

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
2楼2013-05-16 23:29:28
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
会不会是上样量太大,超过胶条的溶胀能力了?
3楼2013-05-17 08:59:22
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Arsene_Lupin

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-05-17 08:59:22
会不会是上样量太大,超过胶条的溶胀能力了?

每次都是350ul啊,其他都没问题的

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
4楼2013-05-17 15:22:12
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