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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物分析 » 紫外可见分光光度计法测定含量
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ivyasspring

金虫 (小有名气)

[求助] 紫外可见分光光度计法测定含量

请问下使用紫外可见分光光度计法测定含量时在绘制标准曲线之后，如何求算试样的含量？
比如在求算多糖含量的时候，用葡萄糖绘制完标注曲线之后，如何计算多糖的含量？
含量（%）=C*D*F*100/w这个公式的字母代表什么呢？如何计算得到的？问题有点多，谢谢大家啦。
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1楼 2013-05-16 09:16:46
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LilyLily19

新虫 (初入文坛)
楼主，我想请问一下DNS测试葡萄糖标准曲线的方法，根据文献中0.1 mL 葡萄糖，0.1 mL水以及0.3mL DNS，100℃，5 min。因为水分的挥发，最后溶液体积可能不太一样，所以测的标准曲线也不是特别直，楼主能不能提供一下细节操作，我感觉我可能某个地方出现了错误。
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18楼2019-11-05 17:57:00
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raulsam1984

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
ivyasspring: 金币+10, ★★★很有帮助 2013-05-16 13:31:28
楼主，通常是标准曲线与供试品同时测定，通过标准曲线的线性方程计算出供试品的含量。标准曲线的浓度是已知的，紫外吸收可以测出来，那就可以形成一条标准曲线（相关因子r至少要0.9998）。你的公式应该是求质量分数吧，C为测得样品溶液中葡萄糖的浓度(μg/ml)；D为样品溶液的稀释倍数；F为换算因素；W为多糖质量(μg)。
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2楼2013-05-16 09:41:22
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ivyasspring

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by raulsam1984 at 2013-05-16 09:41:22
楼主，通常是标准曲线与供试品同时测定，通过标准曲线的线性方程计算出供试品的含量。标准曲线的浓度是已知的，紫外吸收可以测出来，那就可以形成一条标准曲线（相关因子r至少要0.9998）。你的公式应该是求质量分数 ...

嗯。是的。求糖的质量分数。
请问这个稀释倍数和换算因数是怎么求得的呢？
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3楼2013-05-16 09:48:29
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ivyasspring

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by raulsam1984 at 2013-05-16 09:41:22
楼主，通常是标准曲线与供试品同时测定，通过标准曲线的线性方程计算出供试品的含量。标准曲线的浓度是已知的，紫外吸收可以测出来，那就可以形成一条标准曲线（相关因子r至少要0.9998）。你的公式应该是求质量分数 ...

W的值是测定时的质量，还是我一开始取的？比如我一开始取10mg，然后稀释分之成20微克/ml。这个W是哪一个？
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4楼2013-05-16 09:52:30
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