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laughingxixi

金虫 (正式写手)

[交流] 凝血酶溶液配制 已有2人参与

请教大家 最近测定水蛭抗凝血酶,配制0.5%牛纤维蛋白原三羟甲基氨基甲烷盐酸缓冲液,将牛纤维蛋白原加入缓冲液不能完全溶解,有絮状物,超声也不能解决这个问题怎么办?用sigma凝血酶配制40单位/ml的凝血酶溶液,该怎么称量呢?说明书 瓶身上都没有重量,只写了1KU each,打电话给供应商也不知道,我打算把它倒出来称了,求教各位,多谢!
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好好学习,天天向上
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7899014as

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
刚做了,滴加40u的凝血酶5次,没凝固。干脆滴加凝血酶贮备液5ul,凝固了一半。
4楼2018-06-06 12:16:19
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_hangebac

银虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
可在37℃水浴中加热溶解牛纤维蛋白原,若仍有絮状物,可能是部分未溶的杂质,过滤去除即可。至于Sigma凝血酶瓶身上注明的1KU each,应该是每瓶凝血酶的单位是1000 U。用灭菌的一次性针头注射器吸取适量的缓冲液(如5ml)注入瓶中,混匀后吸出,再用一次性过滤器滤出凝血酶溶液置于灭菌离心管中,即得到浓度为200 U/ml(以5ml为例)的凝血酶溶液,冰箱4℃保存。使用时从冰箱取出,稀释成40 U/ml就可以了。
2楼2013-07-18 16:55:26
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7899014as

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我也遇到同样的问题,到底怎么做呢?急
3楼2018-06-06 09:52:04
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