应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » PCR 滞孔
53/1返回列表
查看: 1538  |  回复: 23
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

蓝慧

木虫 (正式写手)

[求助] PCR 滞孔

各位虫子，最近做PCR实在是头痛，重复了几次都是这样的。求各位好心的虫子帮帮忙，看下是什么原因。

用的酶是Takara PrimeStar Max Premix, 体系为20ul, 引物0.4ul.
反应条件是94度3min, 98度10s, 55-58度均试过 15s, 72度1min, 35cycles.目的片段长度是1800bp,

望各位虫子多多发表意见。

玉米根系PCR.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢
向着目标前进！
1楼 2013-05-15 22:07:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

txw87

木虫 (小有名气)
★
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖应助！ 2013-05-18 16:58:19
引用回帖:
23楼: Originally posted by 蓝慧 at 2013-05-18 16:16:05
先谢谢意见，呵呵！再问下，有没有推荐的酶呢？...

NEB的酶、Qiagen的酶、Roche的酶和Invitrogen的酶都不错，具体没用过不知道，你要买的话看准上面有没有适合长片段使用的吧。

这四家价格都比TaKaRa贵些，不过一分钱一分货啊！
赞一下 回复此楼
24楼2013-05-18 16:32:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 24 个回答

wxl007777

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
蓝慧: 金币+1, ★有帮助 2013-05-16 16:21:59
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖应助！ 2013-05-18 16:56:54
模版是什么？看图感觉啥都没有扩出来，孔里亮是蛋白污染
赞一下 回复此楼
2楼2013-05-15 22:08:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sunnyboylg

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
蓝慧(myprayer代发): 金币+1, 感谢你的慷慨解囊，期待你的精彩。 2013-05-16 08:24:35
蓝慧: 金币+2, ★★★很有帮助 2013-05-16 16:22:17
目的基因根本没p出来嘛。原因：1退火温度过高，试试52，50，48的；2退火时间改30s；3延伸时间2min。祝楼主能成功，pcr扩增本来就的慢慢来的。
赞一下 回复此楼
要么读书，要么旅行，身体和灵魂，必须有一个在路上
3楼2013-05-15 22:24:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
蓝慧(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，感谢你的慷慨解囊，期待你的精彩。 2013-05-16 08:24:45
蓝慧: 金币+2 2013-05-16 16:23:15
感觉模板加多了，PCR产物电泳一般看不到模板。点样孔附近的亮带是模板里的DNA蛋白复合物。
赞一下 回复此楼
4楼2013-05-16 06:52:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 24 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 中青基了要发朋友圈吗？ +7 349506619 2026-08-28 7/350 2026-08-31 13:39 by 冼亮淀粉酶
[基金申请] 投票:  有多少人是今天查系统知道结果的？ +17 爱看书的可乐 2026-08-26 19/950 2026-08-31 11:51 by xiangy672
[基金申请] 国社科又开始会评了，不知道这次命运如何 +6 雨打竹帘 2026-08-30 10/500 2026-08-31 09:29 by huixian257
[文学芳草园] 梦想 +4 myrtle 2026-08-26 4/200 2026-08-31 08:43 by 逸域隐帆
[基金申请] 基金不中，共勉 +12 eulota 2026-08-26 12/600 2026-08-31 08:42 by ZJTJZ
[基金申请] 能否申诉？ +6 echo8914667 2026-08-30 7/350 2026-08-31 08:41 by kingkocxr
[基金申请] 国自然评审意见 +13 wangmingqi 2026-08-28 19/950 2026-08-29 10:22 by Poppy1104
[基金申请] 为什么资助数各大高校都创新高，自己申请怎么就这么难 +12 Kittylucky 2026-08-27 13/650 2026-08-29 00:04 by superceng
[基金申请] 系统查不到 +11 董八千 2026-08-26 11/550 2026-08-28 18:06 by Leogzhya
[基金申请] 基金系统什么内容也没有 30+4 winsaint 2026-08-27 9/450 2026-08-28 11:06 by maolC
[基金申请] 怎么查啊 +6 huang1991js 2026-08-26 6/300 2026-08-28 08:42 by winsaint
[基金申请] 基金未中，这种答复是模板吗？ +5 zhaosm1982 2026-08-27 6/300 2026-08-27 16:00 by lfy8008
[基金申请] 看板上这么多中的，有点像50人群里49个人都是骗子的那种感觉…… +5 a089 2026-08-26 6/300 2026-08-27 14:05 by jonewore
[基金申请] 为什么 国际(地区)合作与交流项目 没有放榜？ 10+3 majunge000 2026-08-26 11/550 2026-08-27 08:42 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 我不理解！ +15 Edward_pc 2026-08-26 23/1150 2026-08-26 20:34 by zzuzxg
[基金申请] 出来了 +9 trojank 2026-08-26 9/450 2026-08-26 14:25 by 宝贝虫子
[基金申请] 为什么国自然不能直接公布 +4 bjdxyxy 2026-08-26 4/200 2026-08-26 13:12 by qingmu1201
[基金申请] 系统进不去 +4 yanglien 2026-08-26 5/250 2026-08-26 11:10 by wenfengw83
[基金申请] 在坚冰还盖着北海的时候，我看到了怒放的梅花。 (金币+10) +6 ziyangfang 2026-08-25 9/450 2026-08-25 20:26 by huagongfeihu
[基金申请] 没有任何消息-是不是就凉了 +9 图啦图啦 2026-08-24 10/500 2026-08-25 11:59 by 南海小哥
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭