24小时热门版块排行榜    

查看: 1142  |  回复: 7

lulufantasy

新虫 (小有名气)

[求助] DGGE 条带模糊 无法分离

刚开始做PCR-DGGE。采用OMega试剂盒提取土壤DNA,做PCR后,开始DGGE,条件如下:梯度40-70%,电压160V,跑胶4个半小时,EB染色15min,照相
第一张图为DGGE,左边三个样品较模糊,无法分离
求解答!

70(Q_]3]W4Q5ASH{7_5Z9V9.jpg
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiadongliang

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
wizardfan: 金币+1, 谢谢参与 2013-05-17 08:03:59
胶没有跑开。
看你的图,160V至少得需要5个半小时条带才能跑到下面来。
2楼2013-05-16 09:44:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

20093651

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
wizardfan: 金币+1, 谢谢参与 2013-05-17 08:03:34
你的PCR产物大概是多大?应该是时间短了,我一般都跑180V,5h的
但行好事,莫问前程
3楼2013-05-16 15:16:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

huangk1199

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

首先电压高了,条带有月牙状的,将低电压,延长泳动时间。
第二,变形梯度不对,50%以下无条带,增加低浓度的变性梯度。建议试试30-50%。
一路蚯蚓
4楼2013-05-19 15:40:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lulufantasy

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by xiadongliang at 2013-05-16 09:44:00
胶没有跑开。
看你的图,160V至少得需要5个半小时条带才能跑到下面来。

但是看胶的话,染色带已经跑到了最低端,这是怎么回事呢
5楼2013-05-22 09:47:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lulufantasy

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 20093651 at 2013-05-16 15:16:55
你的PCR产物大概是多大?应该是时间短了,我一般都跑180V,5h的

200bp的,胶上的染色条带已经跑到了底端,怎么回事呢
6楼2013-05-22 09:47:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lulufantasy

新虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by huangk1199 at 2013-05-19 15:40:14
首先电压高了,条带有月牙状的,将低电压,延长泳动时间。
第二,变形梯度不对,50%以下无条带,增加低浓度的变性梯度。建议试试30-50%。

不好意思,我是菜鸟,问个菜鸟问题:这个胶的梯度是如何分布的呢
7楼2013-05-22 09:49:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

huangk1199

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
7楼: Originally posted by lulufantasy at 2013-05-22 09:49:22
不好意思,我是菜鸟,问个菜鸟问题:这个胶的梯度是如何分布的呢...

但是看胶的话,染色带已经跑到了最低端,这是怎么回事呢?
因为先到底端的是溴酚蓝,DNA 结合着甘油在中间没有跑下来。

不好意思,我是菜鸟,问个菜鸟问题:这个胶的梯度是如何分布的呢?
楼主追加金币呀
一路蚯蚓
8楼2013-05-22 13:30:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 lulufantasy 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 这样的filecode谁见过 +10 布布和一二 2026-08-08 20/1000 2026-08-09 16:39 by zxy7909
[基金申请] 应该是93bebmhtak前后十一个字符比较关键 +6 Lanmanbaby 2026-08-09 8/400 2026-08-09 16:24 by zhjj370
[基金申请] filecode与中标关系的预测 +5 布布和一二 2026-08-07 5/250 2026-08-09 16:15 by 袁向阳007
[考博] 【2027博士申请】纳米药物递送方向 20+3 13586093586 2026-08-03 5/250 2026-08-08 21:54 by 13586093586
[基金申请] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 qTvzQBRAHjCi 2026-08-07 4/200 2026-08-08 17:22 by oEVWOejN9taj
[硕博家园] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 qTvzQBRAHjCi 2026-08-07 4/200 2026-08-08 17:19 by oEVWOejN9taj
[考博] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 Vi50GxzrFcSG 2026-08-07 4/200 2026-08-08 16:27 by oEVWOejN9taj
[基金申请] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 Vi50GxzrFcSG 2026-08-07 5/250 2026-08-08 16:27 by oEVWOejN9taj
[基金申请] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 Vi50GxzrFcSG 2026-08-07 4/200 2026-08-08 16:19 by oEVWOejN9taj
[博后之家] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 Vi50GxzrFcSG 2026-08-07 4/200 2026-08-08 16:02 by oEVWOejN9taj
[公派出国] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 Vi50GxzrFcSG 2026-08-07 5/250 2026-08-08 15:59 by oEVWOejN9taj
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 WQyTGMbfH7Cx 2026-08-07 4/200 2026-08-08 15:02 by oEVWOejN9taj
[公派出国] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 HEQlVqMTIA7d 2026-08-07 6/300 2026-08-08 14:39 by oEVWOejN9taj
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 HEQlVqMTIA7d 2026-08-07 5/250 2026-08-08 14:22 by oEVWOejN9taj
[硕博家园] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 Vi50GxzrFcSG 2026-08-07 6/300 2026-08-08 10:19 by 3OOjAIS77qg2
[基金申请] 基金中了 +14 laoda193707 2026-08-06 14/700 2026-08-08 00:23 by 实验小白ha
[基金申请] 化学口download_prp&fileCode的固定段好像这几天一直没变,有变的大神么? +3 Tide man 2026-08-07 4/200 2026-08-07 22:39 by Tide man
[基金申请] 固定端突然变了,今天 +6 archvillain 2026-08-06 10/500 2026-08-07 16:03 by 医学老男孩
[基金申请] 听说今天filecode变了 +24 布布和一二 2026-08-06 47/2350 2026-08-07 16:02 by zhiyanjiang
[基金申请] filecode +14 等待解的谜 2026-08-06 19/950 2026-08-07 12:20 by wlwhappy
信息提示
请填处理意见