应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » DGGE 条带模糊 无法分离
81/1返回列表
查看: 1186  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

lulufantasy

新虫 (小有名气)

[求助] DGGE 条带模糊 无法分离

刚开始做PCR-DGGE。采用OMega试剂盒提取土壤DNA，做PCR后，开始DGGE，条件如下：梯度40-70%，电压160V，跑胶4个半小时，EB染色15min，照相
第一张图为DGGE，左边三个样品较模糊，无法分离
求解答！

70(Q_]3]W4Q5ASH{7_5Z9V9.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-05-15 21:23:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiadongliang

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
wizardfan: 金币+1, 谢谢参与 2013-05-17 08:03:59
胶没有跑开。
看你的图，160V至少得需要5个半小时条带才能跑到下面来。
赞一下 回复此楼
2楼2013-05-16 09:44:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

20093651

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
wizardfan: 金币+1, 谢谢参与 2013-05-17 08:03:34
你的PCR产物大概是多大?应该是时间短了，我一般都跑180V,5h的
赞一下 回复此楼
但行好事，莫问前程
3楼2013-05-16 15:16:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

huangk1199

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

首先电压高了，条带有月牙状的，将低电压，延长泳动时间。
第二，变形梯度不对，50%以下无条带，增加低浓度的变性梯度。建议试试30-50%。
赞一下 回复此楼
一路蚯蚓
4楼2013-05-19 15:40:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lulufantasy

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by xiadongliang at 2013-05-16 09:44:00
胶没有跑开。
看你的图，160V至少得需要5个半小时条带才能跑到下面来。

但是看胶的话，染色带已经跑到了最低端，这是怎么回事呢
赞一下 回复此楼
5楼2013-05-22 09:47:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lulufantasy

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 20093651 at 2013-05-16 15:16:55
你的PCR产物大概是多大?应该是时间短了，我一般都跑180V,5h的

200bp的，胶上的染色条带已经跑到了底端，怎么回事呢
赞一下 回复此楼
6楼2013-05-22 09:47:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lulufantasy

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by huangk1199 at 2013-05-19 15:40:14
首先电压高了，条带有月牙状的，将低电压，延长泳动时间。
第二，变形梯度不对，50%以下无条带，增加低浓度的变性梯度。建议试试30-50%。

不好意思，我是菜鸟，问个菜鸟问题：这个胶的梯度是如何分布的呢
赞一下 回复此楼
7楼2013-05-22 09:49:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

huangk1199

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
7楼: Originally posted by lulufantasy at 2013-05-22 09:49:22
不好意思，我是菜鸟，问个菜鸟问题：这个胶的梯度是如何分布的呢...

但是看胶的话，染色带已经跑到了最低端，这是怎么回事呢？
因为先到底端的是溴酚蓝，DNA 结合着甘油在中间没有跑下来。

不好意思，我是菜鸟，问个菜鸟问题：这个胶的梯度是如何分布的呢？
楼主追加金币呀
赞一下 回复此楼
一路蚯蚓
8楼2013-05-22 13:30:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 lulufantasy 的主题更新
81/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 面上合作单位盖章 +6 ssyjh 2026-08-27 9/450 2026-09-01 20:01 by huagongfeihu
[基金申请] 为什么国自然不能直接公布 +5 bjdxyxy 2026-08-26 5/250 2026-09-01 17:54 by 小伟大博士
[基金申请] 学科评审组评审是指会评吗？ +4 瞬息宇宙 2026-08-31 4/200 2026-09-01 14:58 by jiaoxg
[基金申请] 为什么资助数各大高校都创新高，自己申请怎么就这么难 +13 Kittylucky 2026-08-27 14/700 2026-09-01 11:06 by feng6531
[基金申请] 麻烦专家们看看评委们的意见（F口面上） +7 gdd2018 2026-08-28 12/600 2026-09-01 08:32 by 尼古拉斯小虫
[基金申请] 怎么看青基中了没有啊 +6 叶九微 2026-08-26 6/300 2026-08-31 23:54 by yudaoqian88
[基金申请] 基金未中，这种答复是模板吗？ +6 zhaosm1982 2026-08-27 7/350 2026-08-31 21:18 by qdxxmc
[基金申请] 哪位高人中了，把查询到的截图贴出来让我看看，让我长长见识 +6 yuleib84 2026-08-26 7/350 2026-08-31 19:46 by 鱼翔浅底1
[基金申请] 面上意见出来了 +12 黄鸟于飞Chao 2026-08-29 23/1150 2026-08-31 18:57 by 黄鸟于飞Chao
[基金申请] 能否申诉？ +7 echo8914667 2026-08-30 8/400 2026-08-31 17:00 by yihongxu
[基金申请] 中青基了要发朋友圈吗？ +7 349506619 2026-08-28 7/350 2026-08-31 13:39 by 冼亮淀粉酶
[基金申请] 基金不中，共勉 +12 eulota 2026-08-26 12/600 2026-08-31 08:42 by ZJTJZ
[基金申请] 我就是申请一个面上项目而已，这评审意见是按照杰青的条件评的吧？ +6 gouxfjh 2026-08-28 11/550 2026-08-30 07:57 by gouxfjh
[基金申请] 2026年叶企孙基金 +4 bud_bud 2026-08-27 7/350 2026-08-29 07:23 by foolishmani
[基金申请] 基金系统什么内容也没有 30+4 winsaint 2026-08-27 9/450 2026-08-28 11:06 by maolC
[基金申请] 怎么查啊 +6 huang1991js 2026-08-26 6/300 2026-08-28 08:42 by winsaint
[基金申请] 为什么 国际(地区)合作与交流项目 没有放榜？ 10+3 majunge000 2026-08-26 11/550 2026-08-27 08:42 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 出来了 +9 trojank 2026-08-26 9/450 2026-08-26 14:25 by 宝贝虫子
[基金申请] 系统进不去 +4 yanglien 2026-08-26 5/250 2026-08-26 11:10 by wenfengw83
[基金申请] 国合可查了 +3 paperzjh 2026-08-26 3/150 2026-08-26 10:41 by LemmonTr
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭