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gsq0315

铜虫 (小有名气)

[求助] 原核生物 RNA提取

第一次刚提取的革兰氏阴性共生菌RNA,不知结果怎样,求高手指点。
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  • 2013-05-13 22:31:38, 1.97 M

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longrna

新虫 (正式写手)

★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖应助! 2013-05-19 16:54:02
gyesang: 回帖置顶 2013-05-19 16:54:05
楼主放心,提的质量挺好的。
1)5S很亮不代表提的就降解了。应该具体看什么物种或16s与5s区间是否有弥散。有些物种5S含量多,你用Trizol怎么提它都是会很亮的。
2)26s和16s挺清晰的,两带之间也算是比较干净。--证明没有很明显的降解。(可能由于是原核生物,两条带电泳靠得比较近)
3)至于条带弱应该是产量低,因为你也说到了异丙醇沉淀的无可见的沉淀。(产量低RNA少当然难以看得见团状的沉淀了,这很简单的道理...)
伟大航线....
12楼2013-05-19 16:45:55
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
gsq0315(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,感谢你的慷慨解囊,期待你的精彩。 2013-05-14 11:00:41
质量不好。23S和16S条带太暗,5S太亮,说明降解严重。
2楼2013-05-14 07:49:57
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gsq0315

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-05-14 07:49:57
质量不好。23S和16S条带太暗,5S太亮,说明降解严重。

在提取的时候看不到沉淀是什么原因啊
3楼2013-05-14 13:26:28
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖


gsq0315(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖交流! 2013-05-19 16:52:41
引用回帖:
3楼: Originally posted by gsq0315 at 2013-05-14 13:26:28
在提取的时候看不到沉淀是什么原因啊...

你指用异丙醇或者乙醇沉淀时看不到?有可能是样品量比较少,你定量RNA了吗?还有就是纯净的核酸是透明的,往往看不太到。一般的样品里有一些盐和其它杂质,所以会出现白色沉淀。晾干样品后就会发现白色的沉淀变得透明了。
4楼2013-05-15 07:53:28
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