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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 大家帮忙看看这个电泳怎么这样呀
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山水田园

至尊木虫 (著名写手)

[交流] 大家帮忙看看这个电泳怎么这样呀

我在做小分子化合物对PBR322DNA的作用，可做出来的电泳图像如下：大家帮忙看看是什么原因出现这种情况呀。谢谢！
小弟还不会贴图，只有麻烦大家看连接了！

[ Last edited by 山水田园 on 2007-10-3 at 21:09 ]
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我错了改还不行么
1楼 2007-09-30 16:44:17
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guohuayin

木虫 (著名写手)

博士，副教授
★
plantsoil(金币+1,VIP+0):thx
怎么什么也没有啊？难道你是marker也有问题吗？是不是 你的凝胶成像系统有问题了？
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内生菌资源和核酸分子的利用
2楼2007-09-30 17:07:26
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山水田园

至尊木虫 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by guohuayin at 2007-9-30 05:07 PM:
怎么什么也没有啊？难道你是marker也有问题吗？是不是 你的凝胶成像系统有问题了？

marker?啥意思呀？我是学化学的，要做化学物与PBR的作用。今天是第一次做。
遇到这个问题就不知道是啥原因了。
成像系统没什么问题吧，生物那边一直在用
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我错了改还不行么
3楼2007-09-30 17:13:02
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沙砾

★ ★
plantsoil(金币+2,VIP+0):thx
你跑的是DNA吗？
怎么是这个样子啊
什么都没有撒
Marker就是你要参照的DNA，是有标准的条带的
你所跑的DNA条带大小是根据Marker来判断的。
你的图片跑的什么都没有，强烈建议你找个学生物的帮你跑一下吧
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4楼2007-09-30 17:20:45
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山水田园

至尊木虫 (著名写手)
我跑的是PBR322DNA,是一种质粒DNA，然后化合物与它作用后，会发生双螺旋的解旋，变为线性和切口型的。理想的是应该出现三条带的。会不会我的EB加的太多了，怎么上面全是白色的呀？
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我错了改还不行么
5楼2007-09-30 17:26:50
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larainestar

★ ★
plantsoil(金币+2,VIP+0):thx
EB是加到胶里的还是跑完胶再在EB里浸泡？
一般来说，一半一半是因为dna向正极走，EB在向负极走。
要降低EB浓度。或者直接泡胶。
最好有marker。问问你实验室其他同学。虽然对于质粒来说marker表征不了大小，但是至少可以看出到底是样品的问题还是电泳的问题。
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6楼2007-09-30 17:41:30
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山水田园

至尊木虫 (著名写手)
plantsoil(金币+0,VIP+0):先在帖子里介绍下自己的操作，thx！！ 点第一楼，编辑
我们把EB直接加在胶里面的，会不会是制胶的时候琼脂糖溶解不完全。我们是在电炉上加热的，然后沸腾了看着完全溶解了就开始制胶，在70°左右的时候加的EB
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我错了改还不行么
7楼2007-09-30 18:18:56
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自然风

铁杆木虫 (知名作家)

I'm loving plantsoil
★ ★
plantsoil(金币+2,VIP+0):thx
我们实验室是跑完电泳再用EB染色，你这种在胶里加EB的情况没做过，推测一下：

EB带正电荷，与核酸相反，电泳时间过长，可能与核酸分开，也许会出现你这种情况，可以试试减小电泳时间。

你的样品缓冲液有没有加溴酚蓝之类的指示剂？从你的胶上似乎没有看到指示剂的位置，如果加了，就不应该让指示剂跑出胶外。

如果还是不行，可以先确认dna的量是否足够大。

仅供参考。
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世事喧嚣，人生寂寞
8楼2007-09-30 21:50:49
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xiaopu_yin

金虫 (小有名气)
★ ★
johnsooh(金币+2,VIP+0):国庆快乐..."1"的解释?
1、从第一张图上看，你的样品质粒只有一条带，且在加样孔的下方，可能是正负电极搞反了。
2、胶的制备过程没有问题。
3、建议换新的缓冲液重新电泳
2、pBR322质粒DNA分子的长度为4363bp，按你的实验情况来看，不需要加Marker，只要出现三条带就可以了
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9楼2007-10-01 17:38:32
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yzh-1999

至尊木虫 (著名写手)
正负极搞反了。条带跑出去了。
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强则极辱，情深不寿
10楼2007-10-01 19:15:02
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