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木槿飘扬新虫 (小有名气)
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[求助]
两种小分子量、弱极性物质怎么分开
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| 是用二氯甲烷萃取的东西，极性较弱，点板两种物质迁移率相近，之前过了硅胶柱，但是总是有色素跟着晶体，想把色素给除掉，现在过了Sephadex LH-20，用甲醇-二氯甲烷1:3洗脱，但还是没怎么分开。而且过柱子的时候，100ml的柱体积，大概30ml的时候就能出东西了，不到一个柱体积连色素也洗脱下来了，两种物质总是紧跟在一起。有没有什么好的办法可以把它们分开？ |
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木槿飘扬
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8楼2013-05-12 16:42:33
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2楼2013-05-11 13:03:49
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【答案】应助回帖
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你没有搞清楚LH-20的分离原理，他基本上是基于分子塞在你用的流动（甲醇-二氯甲烷1:3），你的东西如果甲醇的溶解性还行的话，你可以用这个LH-20介质，用甲醇水洗脱下，在这种流动相条件下，这种介质主要还是靠分子塞，还有一点反向的原理。LH-20除去色素一般都是国内文献里写的，我认为基本不靠谱。要想把这两种东西分开，既然你用了硅胶分过了，你可以用反向层析树脂SKP-10-4300分下，这样你用正向+反向应该可以分开了。 如果你的两种东西是同分异构体，或者存在手性那就得用其他办法，比如10um的反向硅胶 或者手性填料了 |
3楼2013-05-11 19:44:16
zhuhuiling21
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4楼2013-05-12 11:44:19
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