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木槿飘扬

新虫 (小有名气)

[求助] 两种小分子量、弱极性物质怎么分开

是用二氯甲烷萃取的东西,极性较弱,点板两种物质迁移率相近,之前过了硅胶柱,但是总是有色素跟着晶体,想把色素给除掉,现在过了Sephadex LH-20,用甲醇-二氯甲烷1:3洗脱,但还是没怎么分开。而且过柱子的时候,100ml的柱体积,大概30ml的时候就能出东西了,不到一个柱体积连色素也洗脱下来了,两种物质总是紧跟在一起。有没有什么好的办法可以把它们分开?
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zhuhuiling21

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
木槿飘扬: 金币+1, 谢谢 2013-05-12 16:50:14
我们也在过硅胶,过sephadex Lh-20,两个极性非常接近的物质根本分不开,而且每过一道柱子,辛辛苦苦分离出的样品还会损失好多。另外也可以尝试一下梯度洗脱,效果会好一些

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
4楼2013-05-12 11:44:19
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guodong2012

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
PSA: 金币+1, 3u 2013-05-11 20:49:08
木槿飘扬: 金币+1 2013-05-12 16:37:33
可以用制备试试看,不过得先找下条件,应该是可以分开的
2楼2013-05-11 13:03:49
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分离高手

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
PSA: 金币+3, 3u 2013-05-11 20:49:17
木槿飘扬: 金币+3, 有帮助 2013-05-12 16:49:15
你没有搞清楚LH-20的分离原理,他基本上是基于分子塞在你用的流动(甲醇-二氯甲烷1:3),你的东西如果甲醇的溶解性还行的话,你可以用这个LH-20介质,用甲醇水洗脱下,在这种流动相条件下,这种介质主要还是靠分子塞,还有一点反向的原理。LH-20除去色素一般都是国内文献里写的,我认为基本不靠谱。要想把这两种东西分开,既然你用了硅胶分过了,你可以用反向层析树脂SKP-10-4300分下,这样你用正向+反向应该可以分开了。
如果你的两种东西是同分异构体,或者存在手性那就得用其他办法,比如10um的反向硅胶 或者手性填料了
3楼2013-05-11 19:44:16
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wanglibo66

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
木槿飘扬: 金币+2, 有帮助 2013-05-12 17:09:11
不妨试试溶剂法,用你结晶不溶的溶剂洗洗色素,色素溶解性比较好的溶剂是丙酮,当然也可以试试别的溶剂,只要是不溶结晶的溶剂都可以试试,一般情况下,小极性的物质可以这么处理。
5楼2013-05-12 14:18:19
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