应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » T-RFLP分析土壤多样性提取DNA图谱
211/3返回列表123下一页
查看: 1729  |  回复: 20
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

xieweijing

金虫 (正式写手)

[求助] T-RFLP分析土壤多样性提取DNA图谱

用OMEGA试剂盒对土壤进行提取DNA,后进行跑胶，再进行PCR检测，用的通用引物27f，1492r，各2ul,模板5ul,supermix25ul,ddh2o16ul,95。5min，95。30s，50。45s，72。1min，35个循环，72.10min。不知道扩增出了没，不太懂，希望大家多指导下，O(∩_∩)O谢谢

提取DNA后分装后合并起来后又跑的胶



PCR后的效果
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
好好加油，为自己，也为自己以后！
1楼 2013-05-10 14:50:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

蓝天飞翔

木虫 (知名作家)

奋斗，小青年

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
xieweijing(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物版块期待你的更多精彩。 2013-05-11 09:39:00
看不见扩出来没有，没扩出来吧
赞一下 回复此楼
忙碌是一种幸福，让我们没时间体会痛苦；奔波是一种快乐，让我们真实地感受生活；疲惫是一种享受，让我们无暇空虚。
2楼2013-05-10 22:43:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xieweijing

金虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 蓝天飞翔 at 2013-05-10 22:43:18
看不见扩出来没有，没扩出来吧

我也感觉没扩出来，不知道原因
赞一下 回复此楼
好好加油，为自己，也为自己以后！
3楼2013-05-11 08:44:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

DoRbIr

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

没扩出来。你可以试试把72℃延伸时间可以增加到90s，我记得这个引物扩增出来的长度是1.5K，1min时间有点悬啊。我当时选引物的时候，就是因为这个长度直接放弃了。
赞一下 回复此楼
4楼2013-05-14 13:23:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

j2

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

没扩出来，延伸时间短了，增加到1分半钟试试吧
赞一下 回复此楼
修炼ｉｎｇ，当虫仙……
5楼2013-05-14 13:51:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xieweijing

金虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by j2 at 2013-05-14 13:51:48
没扩出来，延伸时间短了，增加到1分半钟试试吧

6楼2013-05-14 19:07:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xieweijing

金虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by DoRbIr at 2013-05-14 13:23:39
没扩出来。你可以试试把72℃延伸时间可以增加到90s，我记得这个引物扩增出来的长度是1.5K，1min时间有点悬啊。我当时选引物的时候，就是因为这个长度直接放弃了。

那你也是做T-RFLP吗？那引物用的什么
赞一下 回复此楼
好好加油，为自己，也为自己以后！
7楼2013-05-14 19:07:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

DoRbIr

金虫 (正式写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by xieweijing at 2013-05-14 19:07:54
那你也是做T-RFLP吗？那引物用的什么...

我不做这个，导师说太麻烦了，你可以357f和518r,533f&907r,954f&1369r，这三对都不超过500bp的
赞一下 回复此楼
8楼2013-05-15 15:05:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xieweijing

金虫 (正式写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by DoRbIr at 2013-05-15 15:05:23
我不做这个，导师说太麻烦了，你可以357f和518r,533f&907r,954f&1369r，这三对都不超过500bp的...

羡慕
回复此楼
好好加油，为自己，也为自己以后！
9楼2013-05-15 22:17:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiadongliang

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

27f，1492r
扩增延伸45s是没有问题的。
我一直都在这么做。
退火我用过53度和55度，都扩增的挺好的。
赞一下 回复此楼
10楼2013-05-16 09:41:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 xieweijing 的主题更新
211/3返回列表123下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 本科南方医科大学 一志愿985 药学学硕284分 求调剂 +4 弱水听文 2026-04-09 4/200 2026-04-10 22:01 by doctff
[考研] 368求调剂 +3 17385968172 2026-04-10 3/150 2026-04-10 20:12 by 电子奥德彪
[考研] 中科院总分315求调剂 +8 lallalh 2026-04-09 8/400 2026-04-10 19:30 by dick_runner
[考研] 284求调剂 +9 让我上岸吧阿西 2026-04-09 11/550 2026-04-10 19:18 by 靖jing
[考研] 求调剂 +5 不会飞的鱼@ 2026-04-10 5/250 2026-04-10 19:07 by chemisry
[考研] 284求调剂 +7 archer.. 2026-04-09 8/400 2026-04-09 21:30 by bljnqdcc
[考研] 267求调剂 +5 再忙也要吃饭啊 2026-04-09 5/250 2026-04-09 18:47 by stone_128
[硕博家园] 有没有学校材料专业收跨调(一志愿085410) +5 momo(上岸版) 2026-04-06 8/400 2026-04-09 15:07 by only周
[考研] 一志愿211，0703化学305分求调剂 +20 严西西戏 2026-04-06 26/1300 2026-04-08 22:12 by 凯凯要变帅
[考研] 288环境专硕,求调材料方向 +35 lllllos 2026-04-04 39/1950 2026-04-07 23:24 by 一只好果子?
[考研] 机械调剂 +3 zzzbcb 2026-04-07 3/150 2026-04-07 22:19 by hemengdong
[考研] 307求调剂 +3 Youth@@ 2026-04-07 3/150 2026-04-07 22:00 by hemengdong
[考研] 307求调剂 +3 Youth@@ 2026-04-07 3/150 2026-04-07 09:25 by 小黑不怕难
[考研] 0855求调剂材料 +11 红桃灼灼 2026-04-04 12/600 2026-04-06 10:26 by 蓝云思雨
[考研] 324求调剂 +3 k可乐 2026-04-05 4/200 2026-04-06 09:54 by 蓝云思雨
[考研] 308求调剂 +3 终不似从前 2026-04-05 3/150 2026-04-05 22:23 by hemengdong
[考研] 328分调剂 +6 门men 2026-04-04 6/300 2026-04-05 13:40 by imissbao
[考研] 083200 333求调剂 +3 十二！！ 2026-04-04 3/150 2026-04-05 08:28 by barlinike
[考研] 323求调剂 +8 李佳乐1 2026-04-04 8/400 2026-04-04 22:26 by hemengdong
[考研] 可跨专业调剂 +3 周的得地 2026-04-04 6/300 2026-04-04 22:21 by barlinike
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭