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Love_linlin

新虫 (初入文坛)

[求助] 求助:分光光度法计算

小妹分析新人,最近准备做一个盐酸氨基葡萄糖的检测,在药典上找的方法,如下:【含量测定】对照品溶液的制备  精密称取经105℃干燥至恒重的盐酸氨基葡萄糖对照品适量,加水溶解制成每1ml约含25μg的溶液作为对照品溶液。           供试品溶液的制备  精密称取样品约25mg,置100ml量瓶中,用水溶解并稀释至刻度,摇匀。精密量取上述溶液10ml,置100ml量瓶中,用水稀释至刻度,摇匀,即得。           测定法  分别取对照品溶液及供试品溶液各5ml分别置具塞试管中,另取具塞试管1支,加蒸馏水5ml作为空白,各加乙酰丙酮试液(取乙酰丙酮2ml,加0.5mol/L碳酸钠溶液至50ml,临用前配置)1.0ml,摇匀,置沸水浴中(1分钟后密塞),准确加热25分钟,取出,用冰水迅速冷却后,加无醛乙醇3.0ml,60℃水浴中保温10分钟后,再加对二甲氨基苯甲醛试液(对二甲氨基苯甲醛0.8g,加无醛乙醇15ml及盐酸15ml,摇匀)1.0ml,强力振摇,并继续在60℃水浴中保温1小时,立即用冷水冷却至室温。照分光光度法(中国药典2000年版二部附录ⅣA)在525nm波长处分别测定吸收度,计算,即得。   

我想请问一下,用这个方法测出吸收度后,要怎么计算含量呢?是要知道525nm处的吸收系数吗?公式是否为:A=ECL???525nm处的吸收系数又是多少呢?是个常数吗?
拜托知道的大侠们帮帮小妹啊!!多谢~~!
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sdwyz

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

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对照品比较法:
在规定的波长处(525nm)测定供试品溶液和对照品溶液的吸光度后,按下式计算供试品中被测溶液的浓度:
  Cx=(Ax/Ar)Cr
Cx 为供试品溶液的浓度
Ax 为供试品溶液的吸光度
Cr 为对照品溶液的浓度
Ar 为对照品溶液的吸光度
2楼2013-05-08 10:31:41
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