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smile-kindly

铁虫 (初入文坛)

[求助] 求助 小鼠脑组织石蜡切片操作步骤 已有1人参与

求助

小鼠脑组织固定3天后,进行正常的脱水,透明,包埋后切片,烤完片,一放进二甲苯后就会脱片,有时候更惨的是掉的连渣都不剩了,各位能给点建议么,包埋前的脱水透明的时间有什么特殊要求么,具体是多长时间。


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霁雨菲菲

新虫 (小有名气)

你好,我们新片一般会在60度的烘箱中烤片过夜,第二天在开始脱蜡透明之类的,这样掉片会好一些,旧片只要烤2h左右。然后想请问你有小鼠怎样取脑和怎样做石蜡切片的具体流程么?因为我们最近也要做,所以麻烦你了,谢谢哈
7楼2015-08-24 09:03:19
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tianjiasheng

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

这是不应该出现的情况,脱片与否和前面处理没太大关系,那些一般是影响你切片的。普通HE染色烤片半小时足已,实在不行你就换防脱载玻片吧,在它可以在沸水里煮都不会掉的。
2楼2013-05-10 21:01:31
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dongxie1982

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

这阶段在做肝脏的切片,老是在组织中间裂开进入二甲苯就脱落,我也怀疑是脱水和透明出问题,但及时放入烘箱及不会,如果是脱水和透明的问题切片肯定切不了,出现脱片一般问题在于摊片和烤片,摊片45~50度,烤片70度15~30min,可以适度延长时间,脱水80、90、95、95、100、100各1h,透明:二甲苯两道各15~30min,石蜡各三道各1h
3楼2013-05-12 17:56:46
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DL_nvwu

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

涂抹粘片剂(蛋清:甘油=1:1),延长烤片时间,可以这样试试,我做实验没有出现过类似现象
欢迎学术交流,共同进步
4楼2013-08-02 00:10:52
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