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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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崔永霞

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by xjtu0025 at 2013-05-04 00:22:57
你设计好了,再加酶切位点和保护碱基就好了...加了以后不用管那些二聚体什么的了...肯定会有的...然后P的时候分段式P就效果不错

什么是分段式P？
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每个人都有心底最柔软的地方，请不要触碰它，因为每个人都有自己的尊严！
11楼2013-05-04 19:49:40
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崔永霞

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by HTGe at 2013-05-04 11:25:16
一般大家都习惯用Primer5来设计引物，教程网上有，如果你找不到，留邮箱给我，我发给你。引物设计有 3 条基本原则：首先引物与模板的序列要紧密互补，其次引物与引物之间避免形成稳定的二聚体或发夹结构， 再次引物 ...

非常感谢，我的邮箱是cuiyong.xia@163.com，以前没做过这方面的实验，有点迷茫，真的很感谢你这么热心！还有一个问题就是我设计好引物加完酶切位点之后就出现了引物二聚体和发夹结构，没加酶切位点之前是符合引物设计的原则的。
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每个人都有心底最柔软的地方，请不要触碰它，因为每个人都有自己的尊严！
12楼2013-05-04 20:01:12
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崔永霞

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
12楼: Originally posted by 崔永霞 at 2013-05-04 20:01:12
非常感谢，我的邮箱是cuiyong.xia@163.com，以前没做过这方面的实验，有点迷茫，真的很感谢你这么热心！还有一个问题就是我设计好引物加完酶切位点之后就出现了引物二聚体和发夹结构，没加酶切位点之前是符合引物设 ...

是不是只能换酶切位点了？
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每个人都有心底最柔软的地方，请不要触碰它，因为每个人都有自己的尊严！
13楼2013-05-04 20:02:12
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崔永霞

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by 137167741 at 2013-05-04 13:43:45
楼上说的都挺好的，设计引物没有那么难，首先要先弄清楚，自己得到序列想干什么，然后在根据自己的实验目的去设计引物~~

从两端设计的引物会不会没办法扩出全长啊？
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每个人都有心底最柔软的地方，请不要触碰它，因为每个人都有自己的尊严！
14楼2013-05-04 20:08:58
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HTGe

金虫 (小有名气)
引用回帖:
12楼: Originally posted by 崔永霞 at 2013-05-04 20:01:12
非常感谢，我的邮箱是cuiyong.xia@163.com，以前没做过这方面的实验，有点迷茫，真的很感谢你这么热心！还有一个问题就是我设计好引物加完酶切位点之后就出现了引物二聚体和发夹结构，没加酶切位点之前是符合引物设 ...

教程已发送至你邮箱，请查收；
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» 本帖已获得的红花（最新10朵）

崔永霞
15楼2013-05-04 20:23:13
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137167741

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
崔永霞: 金币+1, ★有帮助 2013-05-05 22:07:12
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖交流！ 2013-05-06 02:06:56
引用回帖:
14楼: Originally posted by 崔永霞 at 2013-05-04 20:08:58
从两端设计的引物会不会没办法扩出全长啊？...

应该可以的，注意一下你是否要去除终止密码子，多设计几对引物，回来验证后筛选一下。酶切位点的选择主要取决于你的目的序列以及所以连接的载体序列上的酶切位点的类型。一般来说可供选择的比较多。祝实验顺利~~
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总有一天我要修改用户名。
16楼2013-05-05 07:58:49
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一一8778

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by panyuzhu at 2013-05-04 11:58:36
什么都不学，就坐享别人手把手的教，楼上的你觉得他会好好看你的建议吗...

中国有句话叫什么来着……，我想不起来了！没有人教我们，我们怎么会有今天，自学成才的天才古往今来又有几人！！！
耐心的指导胜过指责！

难在复杂，高在简单！
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17楼2013-05-05 13:23:15
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
崔永霞: 金币+1, ★有帮助 2013-05-05 22:07:31
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖应助！非常热心的虫子！ 2013-05-06 02:07:17
引物设计软件primer5.0使用经验交流

http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=3421648

附件里有软件和使用说明，可以参考。
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18楼2013-05-05 13:53:02
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)
引用回帖:
17楼: Originally posted by 一一8778 at 2013-05-05 13:23:15
中国有句话叫什么来着……，我想不起来了！没有人教我们，我们怎么会有今天，自学成才的天才古往今来又有几人！！！
耐心的指导胜过指责！

难在复杂，高在简单！...

一一8778说的很对！panyuzhu就是没事就去指责别人！好像自己很了不起！实际上每个人各有其长，谁也不可能不学就会，外星人和未来人除外！
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19楼2013-05-05 13:54:59
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★
崔永霞: 金币+1, ★有帮助, 非常感谢！ 2013-05-05 22:08:59
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖应助！ 2013-05-06 02:20:38
MMB402-PCR Primer Design(Free)

http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=5849940

参考一下。
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20楼2013-05-05 14:25:44
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