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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 引物设计
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崔永霞

铁虫 (小有名气)

[求助] 引物设计

各位高手，知道一个酶的完整的cDNA序列，如何根据这个完整的cDNA序列设计引物，用于PCR扩增。

[ Last edited by gyesang on 2013-5-3 at 19:46 ]
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每个人都有心底最柔软的地方，请不要触碰它，因为每个人都有自己的尊严！
1楼 2013-05-03 12:06:41
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137167741

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
崔永霞: 金币+1, ★有帮助 2013-05-05 22:07:12
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖交流！ 2013-05-06 02:06:56
引用回帖:
14楼: Originally posted by 崔永霞 at 2013-05-04 20:08:58
从两端设计的引物会不会没办法扩出全长啊？...

应该可以的，注意一下你是否要去除终止密码子，多设计几对引物，回来验证后筛选一下。酶切位点的选择主要取决于你的目的序列以及所以连接的载体序列上的酶切位点的类型。一般来说可供选择的比较多。祝实验顺利~~
赞一下 回复此楼
总有一天我要修改用户名。
16楼2013-05-05 07:58:49
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乐乐3952

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
崔永霞: 金币+1, ★有帮助 2013-05-03 13:48:00
崔永霞(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖应助！ 2013-05-03 19:46:53
直接在这个cDNA的两端设计引物不就能扩出来了，加个酶切位点咯
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一花一世界、一叶一菩提
2楼2013-05-03 12:32:49
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崔永霞

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 乐乐3952 at 2013-05-03 12:32:49
直接在这个cDNA的两端设计引物不就能扩出来了，加个酶切位点咯

直接在两端设计的话，primer5显示不符合引物设计的要求，怎么办啊？
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每个人都有心底最柔软的地方，请不要触碰它，因为每个人都有自己的尊严！
3楼2013-05-03 13:47:47
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乐乐3952

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by 崔永霞 at 2013-05-03 13:47:47
直接在两端设计的话，primer5显示不符合引物设计的要求，怎么办啊？...

先设计好，自己再编辑下加个酶切位点就好啊
赞一下 回复此楼
一花一世界、一叶一菩提
4楼2013-05-03 14:08:10
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