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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 引物设计
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崔永霞

铁虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
15楼: Originally posted by HTGe at 2013-05-04 20:23:13
教程已发送至你邮箱，请查收；...

非常干感谢。
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每个人都有心底最柔软的地方，请不要触碰它，因为每个人都有自己的尊严！
21楼2013-05-05 22:00:55
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崔永霞

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
16楼: Originally posted by 137167741 at 2013-05-05 07:58:49
应该可以的，注意一下你是否要去除终止密码子，多设计几对引物，回来验证后筛选一下。酶切位点的选择主要取决于你的目的序列以及所以连接的载体序列上的酶切位点的类型。一般来说可供选择的比较多。祝实验顺利~~...

首先非常感谢！去除终止密码子？那我可不可以跨过起始密码子和终止密码子设计一对引物呢？这样的话是不是扩的全长的概率大一点呢？
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22楼2013-05-05 22:14:02
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崔永霞

铁虫 (小有名气)
谢谢各位的支持和鼓励，我一定会努力的！
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每个人都有心底最柔软的地方，请不要触碰它，因为每个人都有自己的尊严！
23楼2013-05-05 22:17:48
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xjtu0025

新虫 (小有名气)
引用回帖:
11楼: Originally posted by 崔永霞 at 2013-05-04 19:49:40
什么是分段式P？...

因为你一开始酶切位点,保护碱基那些是和模板不匹配的.所以退火温度会低很多....
我是前5轮按照匹配的碱基算退火T,后30轮按照整个长度算.基本是提高了8度吧...没有非特异性条带咯..挺好的
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24楼2013-05-06 00:32:56
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137167741

至尊木虫 (著名写手)
首先、明确自己的实验目的，是做基因表达，还是单纯克隆序列，如果是前者就比较复杂，后者的话，引物设计相对比较简单~~~
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总有一天我要修改用户名。
25楼2013-05-06 08:22:30
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崔永霞

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
24楼: Originally posted by xjtu0025 at 2013-05-06 00:32:56
因为你一开始酶切位点,保护碱基那些是和模板不匹配的.所以退火温度会低很多....
我是前5轮按照匹配的碱基算退火T,后30轮按照整个长度算.基本是提高了8度吧...没有非特异性条带咯..挺好的...

非常感谢！
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26楼2013-05-06 10:55:18
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panyuzhu

禁虫 (小有名气)
本帖内容被屏蔽
27楼2013-05-08 00:11:37
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