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xuzhongrui88

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[交流] 砷钼酸法测还原糖出现沉淀

我用毕赤酵母诱导表达植物的蔗糖转化酶，测酶活的时候是用上清液与蔗糖反应，将蔗糖分解为葡萄糖和果糖，然后用砷钼酸法测定还原糖的量来表示酶活。但是在反应液与铜试剂反应后加入砷钼酸试剂，出现了蓝色的沉淀，用葡萄糖做标准曲线时没有出现沉淀。而对照（上清液里面没有转化酶）的反应也出现了黄色沉淀。刚开始猜测是培养基里面的一些东西的影响，后来用硫酸铵沉淀法提纯蛋白，溶于PBS里面，反应也出现了沉淀，不过相对之前的沉淀来说少多了，而相应的对照里面没有出现黄色沉淀。
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1楼 2013-05-01 19:59:58
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