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njcj

新虫 (小有名气)

[求助] 肽 分离 制备

最近在分离纯化蛋白水解肽,想找到一种有生物活性的肽(具体哪种活性还没想好,呵呵),看文献中,基本都有这么一步:
反相-HPLC分离-制备-做活性。

可是文献中用的色谱柱通常也是4*250mm的C18柱,液相也是普通的安捷伦,这么小的柱子,加上这么小的进样量(通常20uL)怎么制备样品啊?况且还要做抗氧化、抑菌等活性,这要收集多少次啊!想不明白!!
想用制备色谱吧,一是买不起制备柱,二是有了制备柱普通液相也不支持啊,毕竟进样量只有20uL。
请教各位高手,有没有什么好的方法制备啊?
我们有普通的低压分部收集系统(蠕动泵、检测器、采集器、层析柱),能不能用高效分离的C18柱替代层析柱啊?
其他方法给推荐下。
不胜感激!!
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njcj

新虫 (小有名气)

顶起来
2楼2013-04-30 09:14:54
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njcj

新虫 (小有名气)

3楼2013-04-30 16:26:35
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gky01

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
njcj: 金币+2, 有帮助, 谢谢 2013-05-01 19:49:16
建议你到有制备色谱的公司或高校做,省时划算。
steven
4楼2013-04-30 21:13:01
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chadefate

木虫 (著名写手)

既然用小柱子制备试验的话肯定不是20μL进样,而是高浓度过量进样,然后依据出峰情况分别取样,确定哪个时间段能得到合格产品,然后再考虑放大,我也不太懂,只能说这么多了
一家之言,百家之言,自家之言!
5楼2013-06-04 23:17:38
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小羊宝不吃菜

新虫 (初入文坛)

我也在做这种的 要大量生产的 所以也在想制备要用什么方法好
看天空浮云悠游 羡煞了我的不自由
6楼2013-11-07 20:01:39
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