24小时热门版块排行榜    

查看: 2051  |  回复: 9
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

淡墨melon

铜虫 (小有名气)

[求助] 新手SSR,不会区分目的条带,求帮助

1、SSR体系
    10×Taq Buffer(15mM/L Mgcl2)    1.5ul
    5 umol/L 引物                              各1ul
   2U/ul 酶                                       0.5ul
    2.5 dNTPs                                      1ul
    50ng/ul DNA                                 0.4ul
   补水至  15ul

    扩增程序
            94℃  3min
                      94℃  30s
                      55℃  60s
                       72℃ 90s
                       循环35次
            72℃ 7min
            4℃保存
2、 跑胶是 8 %非变性聚丙烯凝胶, 280V  70min
      加3ul上样缓冲液,点样3ul
3、染色是银染法

为什么我的目的条带都聚集在一块,模糊着看不清楚。非特异性条带也多?
回复此楼
活得精彩,不要有遗憾!!
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiaohaiyu

金虫 (正式写手)

先查看引物的目的条带大小,归类,然后再跑胶,不会出现有些还在上面,有些快跑出去了
9楼2013-06-18 21:42:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答

wuxingbo1986

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你这是在筛引物?
2楼2013-04-29 11:02:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

淡墨melon

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by wuxingbo1986 at 2013-04-29 11:02:34
你这是在筛引物?

嗯。我在筛引物
活得精彩,不要有遗憾!!
3楼2013-04-29 16:52:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wuxingbo1986

银虫 (小有名气)

筛引物的话,这比较正常,条带还算比较清楚,多态性还可以的,四份DNA来筛引物是不是有些少了?如果想清楚一些的话,体系应该不用调整,复筛的时候,调整一下退火温度试试看吧。
4楼2013-04-29 21:30:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 281求调剂(0805) +6 烟汐忆海 2026-03-16 16/800 2026-03-19 00:59 by 烟汐忆海
[考研] 一志愿天大材料与化工(085600)总分338 +4 蔡大美女 2026-03-13 4/200 2026-03-18 22:47 by walc
[考研] 一志愿华中科技大学,080502,354分求调剂 +4 守候夕阳CF 2026-03-18 4/200 2026-03-18 22:16 by li123456789.
[考研] 354求调剂 +4 Tyoumou 2026-03-18 7/350 2026-03-18 21:45 by Tyoumou
[考研] 0703化学调剂,求各位老师收留 +9 秋有木北 2026-03-14 9/450 2026-03-18 19:49 by macy2011
[考研] 【同济软件】软件(085405)考研求调剂 +3 2026eternal 2026-03-18 3/150 2026-03-18 19:09 by 搏击518
[考研] 286求调剂 +6 lemonzzn 2026-03-16 9/450 2026-03-18 15:31 by vgtyfty
[考研] 297求调剂 +8 戏精丹丹丹 2026-03-17 8/400 2026-03-18 14:30 by laoshidan
[考研] 304求调剂 +12 小熊joy 2026-03-14 13/650 2026-03-18 12:34 by Linda Hu
[考研] 301求调剂 +4 A_JiXing 2026-03-16 4/200 2026-03-17 17:32 by ruiyingmiao
[考研] 332求调剂 +6 Zz版 2026-03-13 6/300 2026-03-17 17:03 by ruiyingmiao
[考研] 285化工学硕求调剂(081700) +9 柴郡猫_ 2026-03-12 9/450 2026-03-17 10:18 by Sammy2
[论文投稿] 有没有大佬发小论文能带我个二作 +3 增锐漏人 2026-03-17 4/200 2026-03-17 09:26 by xs74101122
[考研] 一志愿华中师范071000,325求调剂 +6 RuitingC 2026-03-12 6/300 2026-03-16 14:50 by 可淡不可忘
[考研] 22408总分284求调剂 +3 InAspic 2026-03-13 3/150 2026-03-15 11:10 by zhq0425
[考研] 复试调剂 +4 z1z2z3879 2026-03-14 5/250 2026-03-14 16:30 by JourneyLucky
[考研] 330求调剂 +3 ?酱给调剂跪了 2026-03-13 3/150 2026-03-14 10:13 by JourneyLucky
[考研] 求调剂 +5 一定有学上- 2026-03-12 5/250 2026-03-13 18:31 by ms629
[考研] 308求调剂 +3 是Lupa啊 2026-03-12 3/150 2026-03-13 14:30 by 求调剂zz
[考博] 福州大学杨黄浩课题组招收2026年专业学位博士研究生,2026.03.20截止 +3 Xiangyu_ou 2026-03-12 3/150 2026-03-13 09:36 by duanwu655
信息提示
请填处理意见