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gengning0427

铜虫 (小有名气)

[求助] LAMP 环介导等温扩散怎么也出不来结果~~求大神们指导!!

最近从导师那接过来个新课题,挺高兴的做上了,主题是关于LAMP的,然后我自己设计引物 查询了一些资料开始做了,体系是25微升的,模板,Bst 与buffer,mg2+,dNTP,这些浓度基本都没什么争议了,四个引物 长的是短的8倍,长的浓度是2umol/L,还有个甜菜碱溶液,我是从化学同学那借的 97%的自己配的(买溶液的时候忘了),根据一些文献上加的,为什么反应后 电泳得到下图、、、marker用的是DL5000,跑出来的明显只在 100bp到250bp之间,而且不是两条整齐的亮带。怎么回事,哪出错了?求助!!

20130428154846.jpg
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zhangtie1998

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
gengning0427(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖应助! 2013-05-10 13:12:21
gengning0427: 金币+3, 有帮助 2013-05-10 14:31:32
Bst酶很重要,其实甜菜碱对于反映体系不是特别重要(酶buffer里含有,我们没有添加甜菜碱),建议可以先买LAMP现成试剂盒,摸索引物是否合适?LAMP产物应是梯状条带,你的图不是!
2楼2013-05-09 21:10:30
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