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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 如何在总RNA上面连接上polyA尾巴呢？
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永远不知道

至尊木虫 (著名写手)

金花家族创始人

[求助] 如何在总RNA上面连接上polyA尾巴呢？

如题，答案完美的BB全给
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1楼 2013-04-27 17:22:15
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gyesang

荣誉版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
永远不知道: 金币+5, 你能把方法告诉我吗？ 2013-04-28 12:55:53
从miRNA的real time说起吧，
用实时定量PCR检测miRNA的表达，通常有两种方法：
1 是茎环法
2 polyA加尾法 这里就涉及到如何在RNA上加polyA尾的问题了，可以用
Poly A Polymerase这个酶，这个酶可以对RNA 3’端进行合成“Poly A”尾，这个酶一般公司都有得买，楼主可以试试

如果楼主非要连接已经合成好的polyA的话，只能试着用RNA ligase了

[ Last edited by gyesang on 2013-4-28 at 02:42 ]
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学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
7楼2013-04-28 02:40:22
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lxg133298

荣誉版主 (文学泰斗)

Stay Hungry. Stay Foolish.

优秀版主优秀版主优秀版主优秀版主优秀版主优秀版主优秀版主
最多给10bb哦
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四时院中竹叶缘，三更梦里墨书香，几度浮生度日暮，一溪烟月枕中藏，雨解情思风锁门，雾迷书亭幻入真。
2楼2013-04-27 17:24:29
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祯嗳溢誓

荣誉版主 (文坛精英)

本只已有主

优秀版主优秀版主
姐姐辛苦了，帮顶
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珍惜时间珍爱自己珍重亲情珍视友情潜心学习努力提升锁定目标拼搏前程
3楼2013-04-27 17:28:13
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runhuahan

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
永远不知道(amisking代发): 金币+3, 感谢 2013-04-27 20:04:48
呵呵呵， 有个试剂盒可以，Epicentre的，叫Poly(A) Polymerase Tailing Kit，货号是：Cat. No. PAP5104H。我做3‘RACE时候用的，挺好用的。
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4楼2013-04-27 18:06:27
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