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1楼2013-04-27 17:22:15

lxg133298

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四时院中竹叶缘，三更梦里墨书香，几度浮生度日暮，一溪烟月枕中藏，雨解情思风锁门，雾迷书亭幻入真。

2楼2013-04-27 17:24:29

祯嗳溢誓

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姐姐辛苦了，帮顶

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3楼2013-04-27 17:28:13

runhuahan

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【答案】应助回帖

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永远不知道(amisking代发): 金币+3, 感谢 2013-04-27 20:04:48

呵呵呵，有个试剂盒可以，Epicentre的，叫Poly(A) Polymerase Tailing Kit，货号是：Cat. No. PAP5104H。我做3‘RACE时候用的，挺好用的。

4楼2013-04-27 18:06:27

永远不知道

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引用回帖:

4楼: Originally posted by runhuahan at 2013-04-27 18:06:27
呵呵呵，有个试剂盒可以，Epicentre的，叫Poly(A) Polymerase Tailing Kit，货号是：Cat. No. PAP5104H。我做3‘RACE时候用的，挺好用的。

用这个就可以直接在植物总RNA上面加尾巴吗？我可不是DNA上面加啊，你再确认一遍

5楼2013-04-27 22:27:12

runhuahan

铜虫 (小有名气)

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永远不知道: 金币+1, 哪个官网？能不能说详细点啊 2013-04-28 12:56:35

引用回帖:

我用的时候是在细菌的总RNA3‘端加的poly（A），植物的行不行你去二批centre的官网上看看protocol吧，应该可以

6楼2013-04-27 22:44:00

gyesang

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【答案】应助回帖

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永远不知道: 金币+5, 你能把方法告诉我吗？ 2013-04-28 12:55:53

从miRNA的real time说起吧，
用实时定量PCR检测miRNA的表达，通常有两种方法：
1 是茎环法
2 polyA加尾法这里就涉及到如何在RNA上加polyA尾的问题了，可以用
Poly A Polymerase这个酶，这个酶可以对RNA 3’端进行合成“Poly A”尾，这个酶一般公司都有得买，楼主可以试试

如果楼主非要连接已经合成好的polyA的话，只能试着用RNA ligase了

[ Last edited by gyesang on 2013-4-28 at 02:42 ]

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7楼2013-04-28 02:40:22