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Enjoy-life新虫 (小有名气)
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LC-MS中的LC与平时分离纯化中的HPLC是一样的吗？有何作用呢？
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HPLC可以直接将混合蛋白样品中的各种组分都很好的分离开，可以说其目的就是分离纯化吧，这个都能理解；但是在LC-MS中也用到了LC，我就想问LC在这个过程中也同样是起到分离纯化的目的吗，且为什么要进行分离纯化呢，还是说有其它的作用？ 一般做质谱之前都要用胰酶将蛋白混合物样品水解成多肽段混合物，那这个LC分离纯化的对象应该就是肽段混合物，而不是未水解处理的蛋白混合物咯，此时我就想反正都是肽段混合物了，即使分离出不同肽段的话有什么意义呢，如果不分离的话，难道就鉴定不出来了吗？因为常规的MALDI-TOF/MS不就是直接将样品水解后的肽段混合物进行离子源处理后继而往下分析就可以了吗，同样能得到质谱结果的啊，所以说我还是想问为什么要加个LC，具体的功效在哪里啊？ 目前，我想做蛋白质谱鉴定啊，该怎么选择LC-MS和MS呢？虽然还是了解了一些理论知识，但是还是有些看不太明白，理解不通（上述就是一个），敬请各位高手们给小弟指点指点，小弟感激不尽呀！ |
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| LC-MS里的LC起到的是分离的作用。 LC-MS的数据是个三维结构，retention time, m/z 和 intensity。最好理解的就是在某一个时间，你有一个MS图。但是一般多肽不太可能在一个时间里全部析出，那当m/z相同的时候，你也可以观察到有峰，那个点就是某个多肽主要的析出时间。当多个多肽享有相同的分子量（或者m/z）的时候，这个RT就是重要的区分手段了。 |
2楼2013-04-26 07:31:40