应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 反相制备柱高效冲洗残留样品的方法？
61/1返回列表
查看: 1263  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

zhuht888

木虫 (小有名气)

[求助] 反相制备柱高效冲洗残留样品的方法？

RP-HPLC制备过程中，样品（小分子肽，含较多羟基）吸附性很强，并在柱子中降解成杂质，造成下一针洗脱样品时引入此杂质，纯乙腈、异丙醇、0.1%TFA乙腈、PBS缓冲盐pH3.0/8.0+60%乙腈、PBS缓冲盐+0.5M高氯酸钠pH3.0+60%乙腈……都不能完全冲洗干净，求高人指教更行之有效的方法！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-04-25 10:39:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

飞翔的石头

银虫 (正式写手)
DMF加磷酸调PH至2.5~3.0，值得一试！
赞一下 回复此楼
我学着不去担心得太远，不计划太多反而能勇敢冒险
2楼2013-04-25 12:42:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

悠悠007

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
建议冲柱子不要用含缓冲盐的流动相，缓冲盐本身容易残留在柱子里，造成柱子堵塞。不知道你的柱子直径是多大的？如果是9.4mm的，可以用0.1mL的甲醇反冲柱子20 min试试，柱子的另一端不接检测器，直接流出。
每天做样前冲洗柱子，做完样后用80%的水+20%的甲醇冲洗柱子，然后在用100%甲醇冲。尽量不用含磷酸盐的缓冲液，如果必须要用，一定放在A相，用完后及时冲洗柱子，进样量不要太大，进2针就及时冲下柱子再接着做。
赞一下 回复此楼
3楼2013-04-25 12:57:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhuht888

木虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 悠悠007 at 2013-04-25 12:57:59
建议冲柱子不要用含缓冲盐的流动相，缓冲盐本身容易残留在柱子里，造成柱子堵塞。不知道你的柱子直径是多大的？如果是9.4mm的，可以用0.1mL的甲醇反冲柱子20 min试试，柱子的另一端不接检测器，直接流出。
每天做样 ...

我使用的是DAC100mm的C18填料的制备柱，我们的产品是用纯甲醇冲洗下来的，70%的甲醇冲不下样品，80%/90%的甲醇洗脱液体积太大！
但用缓冲盐体系冲洗后，会有很多残留的产品出来，纯甲醇不能冲洗下来它们！
但似乎还有残品残留柱子里。
赞一下 回复此楼
4楼2013-04-25 14:30:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhuht888

木虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 飞翔的石头 at 2013-04-25 12:42:30
DMF加磷酸调PH至2.5~3.0，值得一试！

浓度多少？有人建议说是用不要高于5%的DMF冲洗试试，不建议DMF太高比例！还说反相柱最好不要用丙酮和二氯甲烷冲洗！
赞一下 回复此楼
5楼2013-04-25 14:33:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

CAS_小龙

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
缓冲盐冲不太好，酸乙腈也不行的话，可以试试DMSO+THF。二氯很伤柱子，别用。
赞一下 回复此楼
6楼2013-04-26 00:36:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 zhuht888 的主题更新
61/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 298求调剂一志愿211 +3 上岸6666@ 2026-03-20 3/150 2026-03-22 15:50 by ColorlessPI
[考研] 材料与化工085600，总分304，本科有两篇sci参与，求调剂 +3 幸运的酱酱 2026-03-22 4/200 2026-03-22 15:06 by allen-yin
[考研] 291 求调剂 +3 化工2026届毕业� 2026-03-21 3/150 2026-03-22 14:26 by ColorlessPI
[考研] 354求调剂 +7 Tyoumou 2026-03-18 10/500 2026-03-22 11:11 by 人来盛
[考博] 招收博士1-2人 +3 QGZDSYS 2026-03-18 4/200 2026-03-22 10:25 by QGZDSYS
[考研] 一志愿西安交通大学材料工程专业 282分求调剂 +10 枫桥ZL 2026-03-18 12/600 2026-03-21 22:02 by peike
[考研] 材料与化工（0856）304求B区调剂 +3 邱gl 2026-03-20 7/350 2026-03-21 19:05 by 15709483992
[基金申请] 学校已经提交到NSFC，还能修改吗？ 40+4 babangida 2026-03-19 9/450 2026-03-21 16:12 by babangida
[考研] 初始318分求调剂（有工作经验） +3 1911236844 2026-03-17 3/150 2026-03-21 02:33 by JourneyLucky
[考研] 265求调剂 +9 梁梁校校 2026-03-17 9/450 2026-03-21 02:17 by JourneyLucky
[考研] 一志愿 西北大学 ，070300化学学硕，总分287，双非一本，求调剂。 +3 晨昏线与星海 2026-03-18 3/150 2026-03-21 00:46 by JourneyLucky
[考研] 295复试调剂 +8 简木ChuFront 2026-03-19 8/400 2026-03-20 20:44 by zhukairuo
[考研] 一志愿西安交通大学 学硕 354求调剂211或者双一流 +3 我想要读研究生 2026-03-20 3/150 2026-03-20 20:13 by JourneyLucky
[考研] 298-一志愿中国农业大学-求调剂 +9 手机用户 2026-03-17 9/450 2026-03-20 14:24 by 无懈可击111
[论文投稿] 申请回稿延期一个月，编辑同意了。但系统上的时间没变，给编辑又写邮件了，没回复 10+3 wangf9518 2026-03-17 4/200 2026-03-19 23:55 by babero
[考研] 一志愿福大288有机化学，求调剂 +3 小木虫200408204 2026-03-18 3/150 2026-03-19 13:31 by houyaoxu
[考研] 材料考研调剂 +3 xwt。 2026-03-19 3/150 2026-03-19 11:22 by w沐阳w
[考研] 收复试调剂生 +4 雨后秋荷 2026-03-18 4/200 2026-03-18 14:16 by elevennnne
[考研] 有没有道铁/土木的想调剂南林，给自己招师弟中～ +3 TqlXswl 2026-03-16 7/350 2026-03-17 15:23 by TqlXswl
[考研] 275求调剂 +4 太阳花天天开心 2026-03-16 4/200 2026-03-17 10:53 by 功夫疯狂
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭