应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 反相制备柱高效冲洗残留样品的方法？
61/1返回列表
查看: 1452  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

zhuht888

木虫 (小有名气)

[求助] 反相制备柱高效冲洗残留样品的方法？

RP-HPLC制备过程中，样品（小分子肽，含较多羟基）吸附性很强，并在柱子中降解成杂质，造成下一针洗脱样品时引入此杂质，纯乙腈、异丙醇、0.1%TFA乙腈、PBS缓冲盐pH3.0/8.0+60%乙腈、PBS缓冲盐+0.5M高氯酸钠pH3.0+60%乙腈……都不能完全冲洗干净，求高人指教更行之有效的方法！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-04-25 10:39:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

飞翔的石头

银虫 (正式写手)
DMF加磷酸调PH至2.5~3.0，值得一试！
赞一下 回复此楼
我学着不去担心得太远，不计划太多反而能勇敢冒险
2楼2013-04-25 12:42:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

悠悠007

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
建议冲柱子不要用含缓冲盐的流动相，缓冲盐本身容易残留在柱子里，造成柱子堵塞。不知道你的柱子直径是多大的？如果是9.4mm的，可以用0.1mL的甲醇反冲柱子20 min试试，柱子的另一端不接检测器，直接流出。
每天做样前冲洗柱子，做完样后用80%的水+20%的甲醇冲洗柱子，然后在用100%甲醇冲。尽量不用含磷酸盐的缓冲液，如果必须要用，一定放在A相，用完后及时冲洗柱子，进样量不要太大，进2针就及时冲下柱子再接着做。
赞一下 回复此楼
3楼2013-04-25 12:57:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhuht888

木虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 悠悠007 at 2013-04-25 12:57:59
建议冲柱子不要用含缓冲盐的流动相，缓冲盐本身容易残留在柱子里，造成柱子堵塞。不知道你的柱子直径是多大的？如果是9.4mm的，可以用0.1mL的甲醇反冲柱子20 min试试，柱子的另一端不接检测器，直接流出。
每天做样 ...

我使用的是DAC100mm的C18填料的制备柱，我们的产品是用纯甲醇冲洗下来的，70%的甲醇冲不下样品，80%/90%的甲醇洗脱液体积太大！
但用缓冲盐体系冲洗后，会有很多残留的产品出来，纯甲醇不能冲洗下来它们！
但似乎还有残品残留柱子里。
赞一下 回复此楼
4楼2013-04-25 14:30:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhuht888

木虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 飞翔的石头 at 2013-04-25 12:42:30
DMF加磷酸调PH至2.5~3.0，值得一试！

浓度多少？有人建议说是用不要高于5%的DMF冲洗试试，不建议DMF太高比例！还说反相柱最好不要用丙酮和二氯甲烷冲洗！
赞一下 回复此楼
5楼2013-04-25 14:33:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

CAS_小龙

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
缓冲盐冲不太好，酸乙腈也不行的话，可以试试DMSO+THF。二氯很伤柱子，别用。
赞一下 回复此楼
6楼2013-04-26 00:36:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 zhuht888 的主题更新
61/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭