应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » PCR产物无条带？
52/1返回列表
查看: 1653  |  回复: 12
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

jkamm

金虫 (正式写手)

[求助] PCR产物无条带？

我做DNA电泳有条带（见图），但PCR产物电泳不有条带，找不到原因，求救。
30UL体系：Taq buffer(Mg2+)  3ul
                    dNTPs (2.5mM) 2.4ul
                     上游引物(20um/L)    1.2ul
                    下游引物 (20um/L)    1.2ul
                   ddH2O     22.1ul
                    Taq 酶  0.3U
                   DNA 模版 1.2ul

Z4 B1-G3 2013-04-24 20 小时 53 分钟.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2013-04-24 23:25:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jkamm

金虫 (正式写手)
做过梯度PCR，找到最佳退火温度，目的片段800bp。
同样体系，重复试验结果无条带了。
赞一下 回复此楼
13楼2013-04-26 10:15:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 13 个回答

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
jkamm(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰手有余香。期待你的慷慨解囊。快乐每一天 2013-04-25 16:55:08
你的DNA模板电泳时点了多少微升？感觉你的模板浓度不小，做PCR应该稀释后使用。
赞一下 回复此楼
2楼2013-04-25 01:34:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

此外，你可以检查是不是退火温度不合适，目的片段大小多少，PCR延伸时间是否够。
赞一下 回复此楼
3楼2013-04-25 01:39:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jkamm

金虫 (正式写手)
想着可能模版问题，不知是什么。DNA上样5ul，最左边一个样是PCR结果较好的DNA对照，这个体系我已将引物减半了，模版没减。
赞一下 回复此楼
4楼2013-04-25 08:34:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 13 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭