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亲和素磁珠上DNA的洗脱
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liulanhua
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亲和素磁珠上DNA的洗脱
各位虫友,我最近用亲和素磁珠连接上带生物素的DNA探针,然后与互补链杂交,但是杂交后怎么把杂交上的DNA互补链再洗脱下来啊? 各位做过相关实验的帮帮忙啊
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Originally posted by
panyuzhu
at 2013-04-23 18:09:44
是不是想拉成单链啊,加终浓度为0.2M NaoH,孵育一小会,然后离心。磁珠结合的是带生物素的那条,上清是另外一条。有什么不懂的,再联系
用0.2M的NaOH不会破坏亲和素吗?亲和素不是蛋白嘛,强碱会不会使亲和素变性,从而使带生物素的DNA也洗下来啊?
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panyuzhu
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你的是不是卵白素偶联的琼脂糖树脂与生物素偶联的DNA结合?
我用的是链酶亲和素磁珠,上面连上带生物素的DNA探针,然后与互补链进行杂交,我想把杂交上去的互补链能洗脱下来使DNA探针能重复利用,这就要求洗脱液既能把杂交链洗脱下来,有保证亲和素生物素的作用力不被破坏。
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2013-04-24 11:12:46
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