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cctv123abc

铜虫 (小有名气)

[求助] 关于鬼笔环肽和PI或者DAPI复染的问题,

我以前做过发红光的鬼笔染细胞质,DAPI(蓝色)染细胞核,大概过程就是1甲醛固定,2加鬼笔40分钟,3加DAPI染核10分钟

最近要用发绿光的鬼笔染细胞质,PI(红色)染核,操作过程是不是一样呢?求助下各位同学。谢了。
我记得PI是染死细胞的,一般几十秒即可完成染色,那么用鬼笔(绿色)和PI复染,染色时间上是不是该调整?还有就是发绿光的和发红光的鬼笔,操作过程也一样不??
十分感谢!!
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夏南

金虫 (正式写手)

深度强迫症患者

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
fool_proof: 金币+1, 欢迎常来生物材料版应助交流 2013-04-21 14:37:09
cctv123abc: 金币+8, ★★★很有帮助, 非常感谢,染核还是用dapi了 2013-04-21 17:45:58
我自己的经验,鬼笔环肽燃骨架以后再加PI染色的话,PI的染色性太强,把绿色都遮盖住了。详见下图:

副本.jpg

假装文艺青年的科技工作者。
3楼2013-04-21 14:16:55
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aircraftvip

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
fool_proof: 金币+2, 专家考核, 欢迎常来生物材料版应助交流 2013-04-21 10:19:58
cctv123abc: 金币+8, ★★★很有帮助, 谢谢 2013-04-21 17:48:33
染色时间应该根据绿光鬼笔说明书而定,比如,FITC-鬼笔室温染色 30-60 分钟。
http://www.gotofcm.com/pdf/20098 ... %AF%B4%E6%98%8E.pdf

另外需要根据两个染料的光物理性质选择合适的filter去观测。见附加文献。

good luck!

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格物致知,知行合一
2楼2013-04-21 03:57:14
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