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麦堂straw银虫 (小有名气)
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[求助]
蛋白质糖基化位点鉴定
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在毕赤酵母中新表达一个重组蛋白，已确定其发生了糖基化现象，现想对其进行糖基化位点的鉴定，主要想通过胶内酶解——肽段富集——质谱分析——数据库检索等系列流程，问一下小木虫的各位大侠，有没有做过相关的工作，在国内一般哪个公司或研究机构做的比较好收费便宜？ 谢谢各位！  |
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想鉴定糖修饰类型和糖修饰位点的话，MALDI-TOF是不能完成的，MALDI-TOF只能检测酶解肽段的m/z信息，不能给出更多的数据，必须用LC-MS/MS二级质谱来做。但是这里有个问题，就是糖基化修饰的共价键比较容易打断，国内很多的二级质谱用的是CID或者HCD，高能氦气进行碎化处理，很容易丢失糖基化修饰，所以，牵涉到糖基化修饰定位，但凡能鉴定出来多少就是多少了，不求完全鉴定。北京那边的质谱我做过检测分子量的（maldi-tof），没做出来，不知道是不是我运气不好。国内糖基化修饰钱小红做的比较好（其他人不知道），她鉴定了一系列的肝病相关糖基化修饰。楼主要做的和隔壁实验室一个同学做的非常类似，要鉴定酵母表达蛋白的糖基化修饰，去了一个北京的质谱实验室摸了一下条件，最后不了了之。祝你好运！！！ |
13楼2013-04-23 21:28:43
凌波丽
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。3楼2013-04-20 12:00:59
麦堂straw
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5楼2013-04-20 12:32:02
凌波丽
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6楼2013-04-20 12:41:06