| 查看: 3261 | 回复: 8 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
liuquan0814金虫 (小有名气)
|
[求助]
细胞生长在凝胶后，梯度酒精脱水时凝胶的固定问题
|
|
|
细胞（成纤维细胞）在水凝胶（高约为1mm）上面生长两天后，采用戊二醛固定，隔夜处理后，PBS清洗三次。24孔板中的凝胶采用梯度酒精进行脱水处理，至于扫描电镜下拍照，但是几个样品都看不到细胞。觉得会不会是因为梯度脱水时，凝胶收缩，其结构发生了较大的变化，使得细胞脱落？梯度酒精处理的时候要不要将水凝胶固定？怎么固定呢？求大虾支招 PS：没有采用梯度酒精处理，而是采用冷冻干燥处理的凝胶，一样在扫描电镜下看不到细胞。 |
回复此楼» 猜你喜欢
这些Scopus收录的英文国际期刊正在征稿（快速审稿）2026年底前免APC！
已经有12人回复
-
做mRNA体外加帽，Cap0转Cap1效率不稳？分享一款2´-O甲基转移酶实测感受
已经有0人回复
-
生物力学与组织工程学论文润色/翻译怎么收费?
已经有88人回复
-
美国南加大(USC)药学院Prof. Yong (Tiger) Zhang课题组诚聘博士后
已经有4人回复
-
反应产物总提不上量？聊聊无机焦磷酸酶在核酸合成里的实用价值
已经有0人回复
-
【经验分享】体外转录踩坑无数，挖到一款好用的国产 T7 RNA 聚合酶
已经有0人回复
-
体外转录 / PCR 总提不上产量？终于找到稳定好用的无机焦磷酸酶
已经有5人回复
-
[会议预告]2026生物医药产业发展大会
已经有0人回复
-
【产品测评分享】体外转录产量不理想、dsRNA 副产物高？T7 RNA 聚合酶实测体验
已经有3人回复
liuquan0814
金虫 (小有名气)
- 应助: 55 (初中生)
- 金币: 1528.5
- 散金: 41
- 红花: 2
- 帖子: 262
- 在线: 101.4小时
- 虫号: 1004781
- 注册: 2010-04-24
- 性别: GG
- 专业: 生物医用高分子材料
6楼2013-04-18 09:18:12
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
黄酮: 金币+1, 谢谢回帖交流 2013-04-17 21:10:08
liuquan0814(红舟流星代发): 金币+4, 代扣代发金币 2013-08-31 12:16:22
感谢参与，应助指数 +1
黄酮: 金币+1, 谢谢回帖交流 2013-04-17 21:10:08
liuquan0814(红舟流星代发): 金币+4, 代扣代发金币 2013-08-31 12:16:22
| 固定生物材料上的细胞时戊二醛的浓度最好用3%的，浓度过高会引起水凝胶的交联反应；此外材料浸泡在戊二醛溶液中一般只要半小时就可以进行乙醇的梯度脱水处理了；虽然脱水后材料结构会变化，引起细胞变形，但细胞脱落的情况比较少。。。。。。。。。。。此外，个人认为水凝胶材料比较透明，且吸水性强，脱水后会使细胞生长情况失真，可以对细胞染色后直接在荧光显微镜下拍照（类似免疫荧光） |
2楼2013-04-17 20:31:35
yifeng1206
铁杆木虫 (著名写手)
- 应助: 75 (初中生)
- 金币: 6164.4
- 散金: 1350
- 红花: 22
- 帖子: 1510
- 在线: 863.3小时
- 虫号: 734148
- 注册: 2009-03-29
- 性别: MM
- 专业: 生物材料
3楼2013-04-17 22:11:38
晚香玉
木虫 (正式写手)
- 应助: 50 (小学生)
- 金币: 6521.5
- 红花: 4
- 帖子: 770
- 在线: 634.3小时
- 虫号: 1004904
- 注册: 2010-04-24
- 性别: GG
- 专业: 生物医用高分子材料
4楼2013-04-17 23:42:43
