| 查看: 2554 | 回复: 8 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
liuquan0814金虫 (小有名气)
|
[求助]
细胞生长在凝胶后，梯度酒精脱水时凝胶的固定问题
|
|
|
细胞（成纤维细胞）在水凝胶（高约为1mm）上面生长两天后，采用戊二醛固定，隔夜处理后，PBS清洗三次。24孔板中的凝胶采用梯度酒精进行脱水处理，至于扫描电镜下拍照，但是几个样品都看不到细胞。觉得会不会是因为梯度脱水时，凝胶收缩，其结构发生了较大的变化，使得细胞脱落？梯度酒精处理的时候要不要将水凝胶固定？怎么固定呢？求大虾支招 PS：没有采用梯度酒精处理，而是采用冷冻干燥处理的凝胶，一样在扫描电镜下看不到细胞。 |
回复此楼» 猜你喜欢
26秋季生物学方向博士申请
已经有4人回复
-
一志愿暨大生物学290求求调剂
已经有8人回复
-
生物物理、生物化学与分子生物学论文润色/翻译怎么收费?
已经有194人回复
-
厦大309分生物与医药调剂
已经有0人回复
-
334生物求调剂
已经有0人回复
-
一志愿中山大学生物学，295分，求A区调剂
已经有2人回复
-
求助化合物CD数据的处理
已经有0人回复
-
广州医科大学生物医学工程学院 生物医学工程工学-083100 招生
已经有5人回复
-
一志愿湖南大学 生物学332分 有国奖+省级
已经有1人回复
yifeng1206
铁杆木虫 (著名写手)
- 应助: 75 (初中生)
- 金币: 6164.4
- 散金: 1350
- 红花: 22
- 帖子: 1510
- 在线: 861.7小时
- 虫号: 734148
- 注册: 2009-03-29
- 性别: MM
- 专业: 生物材料
3楼2013-04-17 22:11:38
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
黄酮: 金币+1, 谢谢回帖交流 2013-04-17 21:10:08
liuquan0814(红舟流星代发): 金币+4, 代扣代发金币 2013-08-31 12:16:22
感谢参与，应助指数 +1
黄酮: 金币+1, 谢谢回帖交流 2013-04-17 21:10:08
liuquan0814(红舟流星代发): 金币+4, 代扣代发金币 2013-08-31 12:16:22
| 固定生物材料上的细胞时戊二醛的浓度最好用3%的，浓度过高会引起水凝胶的交联反应；此外材料浸泡在戊二醛溶液中一般只要半小时就可以进行乙醇的梯度脱水处理了；虽然脱水后材料结构会变化，引起细胞变形，但细胞脱落的情况比较少。。。。。。。。。。。此外，个人认为水凝胶材料比较透明，且吸水性强，脱水后会使细胞生长情况失真，可以对细胞染色后直接在荧光显微镜下拍照（类似免疫荧光） |
2楼2013-04-17 20:31:35
晚香玉
木虫 (正式写手)
- 应助: 50 (小学生)
- 金币: 6519.5
- 红花: 4
- 帖子: 769
- 在线: 634小时
- 虫号: 1004904
- 注册: 2010-04-24
- 性别: GG
- 专业: 生物医用高分子材料
4楼2013-04-17 23:42:43
liuquan0814
金虫 (小有名气)
- 应助: 55 (初中生)
- 金币: 1528.5
- 散金: 41
- 红花: 2
- 帖子: 262
- 在线: 101.4小时
- 虫号: 1004781
- 注册: 2010-04-24
- 性别: GG
- 专业: 生物医用高分子材料
5楼2013-04-18 08:51:45
