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青菜小虫

银虫 (著名写手)

风居住的街道

[求助] 菌悬液CFU/ML与OD值之间怎么换算

eg:将金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌的新鲜培养物分别接种于营养琼脂培养基上,将生孢梭菌的新鲜培养物接种于硫乙醇酸盐流体培养基中,在30-35℃培养18-24小时,上述培养物用0.9%无菌氯化钠溶液制成<100CFU/ml的菌悬液;将白色念珠菌接种在改良马丁培养基中,在20-25℃培养24-48小时,用0.9%无菌氯化钠溶液制成<100CFU/ml的菌悬液;将黑曲霉的新鲜培养物接种至改良马丁琼脂培养基上,23-28℃培养5-7天,用3-5ml无菌的含0.05%聚山梨酯80的0.9%无菌氯化钠溶液制成<100CFU/ml的孢子悬液。

通过测定OD值,100CFU/ml的菌悬液怎么制备啊?请各位高手指点
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梦幻未碎

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与,应助指数 +1
青菜小虫: 金币+1, ★有帮助 2013-04-27 20:56:14
根据OD值——菌浓度的标准曲线计算结果,再适当稀释呀……

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
开阔
2楼2013-04-17 00:44:46
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普通回帖

匿名

用户注销 (知名作家)

★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
zhangxingc: 金币+1, 欢迎常到微生物版 2013-04-17 08:40:35
青菜小虫: 金币+3, ★★★很有帮助 2013-04-27 20:55:40
本帖仅楼主可见
3楼2013-04-17 07:58:25
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yuanjun0106

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
青菜小虫: 金币+2, ★★★很有帮助 2013-04-27 20:55:55
每次取样测OD值,应稀释到OD值为0.4~0.8用于计算菌液OD,同时该样应作梯度稀释,测CFU,应多测几次,菌液OD值与CFU应为正比关系(如:OD 1.0=280亿/ml),找到OD与CFU的对应关系,得到OD值后,只需按比例稀释菌液即可得到所需CFU的菌液。工作量很大的哟!祝顺利!
悟
4楼2013-04-17 17:22:08
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襄阳蓉儿

新虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by yuanjun0106 at 2013-04-17 17:22:08
每次取样测OD值,应稀释到OD值为0.4~0.8用于计算菌液OD,同时该样应作梯度稀释,测CFU,应多测几次,菌液OD值与CFU应为正比关系(如:OD 1.0=280亿/ml),找到OD与CFU的对应关系,得到OD值后,只需按比例稀释菌液即 ...

几倍稀释呢?我摇的单菌落OD是大于1了,然后十倍稀释稀释到第3管之后OD都是0了
少壮不努力,长大pcr
5楼2013-04-27 14:56:01
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yuanjun0106

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
5楼: Originally posted by 襄阳蓉儿 at 2013-04-27 14:56:01
几倍稀释呢?我摇的单菌落OD是大于1了,然后十倍稀释稀释到第3管之后OD都是0了...

你的稀释倍数太大,OD值大于1,可作对倍稀释后测OD,如OD落在0.4~0.8,则将检测值乘上检测稀释倍数得到实际OD,如仍处在范围外,继续对倍稀释,测OD,直至落到范围内。
悟
6楼2013-04-28 13:25:56
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襄阳蓉儿

新虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by yuanjun0106 at 2013-04-28 13:25:56
你的稀释倍数太大,OD值大于1,可作对倍稀释后测OD,如OD落在0.4~0.8,则将检测值乘上检测稀释倍数得到实际OD,如仍处在范围外,继续对倍稀释,测OD,直至落到范围内。...

“如OD落在0.4~0.8,则将检测值乘上检测稀释倍数得到实际OD”这个意思是不是这样的:我先对半稀释,加入第三个稀释度的OD是0.8,那么第四个稀释度的OD是0.4对吗?
少壮不努力,长大pcr
7楼2013-04-28 14:33:11
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襄阳蓉儿

新虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by yuanjun0106 at 2013-04-28 13:25:56
你的稀释倍数太大,OD值大于1,可作对倍稀释后测OD,如OD落在0.4~0.8,则将检测值乘上检测稀释倍数得到实际OD,如仍处在范围外,继续对倍稀释,测OD,直至落到范围内。...

我测出来的稀释度高的OD值倾注平板后24h观察有培养基表面的菌落,也有长在培养基内部的很小很小的菌,密密麻麻的,没法儿计数,不知道该不该把那些很小的掉电寄进去,按道理说长出来这么多,不可能测出来的OD值这么小啊
少壮不努力,长大pcr
8楼2013-04-28 14:44:29
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fanglu001

禁虫 (小有名气)

本帖内容被屏蔽

9楼2014-04-27 15:50:11
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匿名

用户注销 (知名作家)

本帖仅楼主可见
10楼2014-04-28 20:14:40
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