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gya89

铜虫 (小有名气)

[求助] 微生物拮抗物质提取

想提取一株菌的拮抗物质,还不知道是哪种拮抗物质,在平板上做拮抗圈,上清是用水溶还是拿甲醇 、乙醇、乙酸乙酯类的有机溶剂提取?求指教
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gengning0427

铜虫 (小有名气)

★ ★ ★
zhang8826857: 金币+3, 鼓励回帖 2013-04-19 16:32:01
引用回帖:
5楼: Originally posted by gya89 at 2013-04-19 11:57:06
菌还没鉴定出来  应该是脂肽或者蛋白类的物质 想拿上清冷冻干燥的 再取有机溶剂溶解做拮抗圈  物质这块没做过所以不是很懂  你是说水和乙酸乙酯可以 甲醇乙醇不大可取是么...

上清来冷冻干燥?这得要好久的功夫吧。为什么要用有机溶剂来溶解做拮抗圈呢?你有实验过你的有机溶剂会不会自己形成拮抗圈呢?如果能冷冻干燥下来的话,最好还是用水来溶解,相当于浓缩了,然后做拮抗实验。甲醇和乙醇是与水互溶的,拿这个是提取不出来拮抗物质的,较好的结果是你用这两个醇能把拮抗物质沉淀下来,然后离心去上清,收集沉淀,再拿水溶,然后做抑菌实验。令一方面,这两个醇几乎对所有细菌有拮抗作用,一定要注意他俩的实验方法。如果LZ现在只是想做抑菌实验,最好还是旋转蒸发它的发酵液,达到浓缩目的;如果想纯化这个拮抗物质,再用乙酸乙酯、甲醇乙醇沉淀或者酸碱沉淀等方法来做。

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戒掉安逸 多逼逼自己
6楼2013-04-19 13:05:59
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贤愚Libra

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gya89: 金币+2 2013-04-18 09:50:12
laozuzunzhe: 金币+1, 鼓励交流! 2013-04-21 15:08:02
我不懂,但如果不能确定,可以两种溶剂都做,严谨。
www------sr-------------
2楼2013-04-17 21:10:02
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xiyang139

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我也在做这个 几种都可以试试
宝剑锋从磨砺出
3楼2013-04-18 14:54:53
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gengning0427

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gya89: 金币+5, ★★★很有帮助 2013-04-19 11:57:29
laozuzunzhe: 金币+5, good! 2013-04-21 15:08:15
LZ的是什么菌?这种菌你查过文献都分泌那些抗菌物质吗?上清用甲醇 、乙醇溶的话,相当于把抗菌物质给稀释了,这两种溶剂还有一种状况,就是把活性物质沉淀下来了,总的效果来说不太好,要是只做抑菌实验的话,劝LZ把发酵液离心的上清浓缩,不错的办法,就是时间可能要久点,毕竟旋转蒸发的是水,比较慢,或者用乙酸乙酯这些中极性的有机溶液抽提,如果能抽提出来,也是一种不错的渠道,望楼主接收,如有问题可以接着再问。
戒掉安逸 多逼逼自己
4楼2013-04-18 16:31:04
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