24小时热门版块排行榜    

查看: 1405  |  回复: 8
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

zhxzzzzzz

铜虫 (初入文坛)

[求助] 提取的12kb的pHB质粒总比线性的跑得慢,为什么?

最近一直用全式金的小提试剂盒提取一个表达载体,12kb,提出的质粒只有一条带。1%胶电泳时,提出的质粒pHB总是比单酶切的pHB跑得慢,是因为提出来的不是超螺旋吗?是我提的手法有问题,还是其它的原因?我都不知道这样的质粒能不能用来做下一步的酶切连接转化了。
回复此楼
寻寻觅觅,谁在灯火阑珊处?
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

kernim

金虫 (正式写手)

引用回帖:
7楼: Originally posted by hnxxring at 2013-05-13 20:35:00
请问有PHB的图谱和序列吗?我们想换一下载体,了解了一些这个载体的信息,但是找不到图谱和序列,如果有还望楼主能够分享,谢谢

找到原载体图了吗? 同求
9楼2018-03-21 16:16:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答

wxf8470

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
wizardfan: 金币+2, 谢谢分享经验 2013-04-14 08:36:05
不影响使用!包括酶切,转染,转化,表达分析啊什么的。
不是超螺旋,两条链中有一条断了。
大质粒经常遇到,再温柔一些可能就得到超螺旋的了。
2楼2013-04-13 19:21:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhxzzzzzz

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by wxf8470 at 2013-04-13 19:21:40
不影响使用!包括酶切,转染,转化,表达分析啊什么的。
不是超螺旋,两条链中有一条断了。
大质粒经常遇到,再温柔一些可能就得到超螺旋的了。

谢谢了!那就可以按测OD得到的浓度来计算双酶切需要的载体量了?我以为是按超螺旋的量来算的。
寻寻觅觅,谁在灯火阑珊处?
3楼2013-04-13 19:54:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wxf8470

木虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by zhxzzzzzz at 2013-04-13 06:54:48
谢谢了!那就可以按测OD得到的浓度来计算双酶切需要的载体量了?我以为是按超螺旋的量来算的。...

当然可以,放心往下做吧!
4楼2013-04-13 20:27:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
信息提示
请填处理意见