应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 提取的12kb的pHB质粒总比线性的跑得慢，为什么？
91/1返回列表
查看: 1679  |  回复: 8
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

zhxzzzzzz

铜虫 (初入文坛)

[求助] 提取的12kb的pHB质粒总比线性的跑得慢，为什么？

最近一直用全式金的小提试剂盒提取一个表达载体，12kb，提出的质粒只有一条带。1%胶电泳时，提出的质粒pHB总是比单酶切的pHB跑得慢，是因为提出来的不是超螺旋吗？是我提的手法有问题，还是其它的原因？我都不知道这样的质粒能不能用来做下一步的酶切连接转化了。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
寻寻觅觅，谁在灯火阑珊处？
1楼 2013-04-13 15:00:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wxf8470

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
wizardfan: 金币+2, 谢谢分享经验 2013-04-14 08:36:05
不影响使用！包括酶切，转染，转化，表达分析啊什么的。
不是超螺旋，两条链中有一条断了。
大质粒经常遇到，再温柔一些可能就得到超螺旋的了。
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2013-04-13 19:21:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhxzzzzzz

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by wxf8470 at 2013-04-13 19:21:40
不影响使用！包括酶切，转染，转化，表达分析啊什么的。
不是超螺旋，两条链中有一条断了。
大质粒经常遇到，再温柔一些可能就得到超螺旋的了。

谢谢了！那就可以按测OD得到的浓度来计算双酶切需要的载体量了？我以为是按超螺旋的量来算的。
赞一下 回复此楼
寻寻觅觅，谁在灯火阑珊处？
3楼2013-04-13 19:54:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wxf8470

木虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by zhxzzzzzz at 2013-04-13 06:54:48
谢谢了！那就可以按测OD得到的浓度来计算双酶切需要的载体量了？我以为是按超螺旋的量来算的。...

当然可以，放心往下做吧！
赞一下 回复此楼
4楼2013-04-13 20:27:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

半边脸

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

2楼说的对，可能是其中一条链断裂的原因，不影响使用，反正你经过酶切验证就可以了
赞一下 回复此楼
5楼2013-04-29 17:02:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hnxxring

铁虫 (初入文坛)
楼主，请问有PHB的图谱和序列吗？我们想换一下载体，了解了一些这个载体的信息，但是找不到图谱和序列，如果有还望楼主能够分享，谢谢
赞一下 回复此楼
早死早超生
6楼2013-05-13 20:34:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hnxxring

铁虫 (初入文坛)
请问有PHB的图谱和序列吗？我们想换一下载体，了解了一些这个载体的信息，但是找不到图谱和序列，如果有还望楼主能够分享，谢谢
赞一下 回复此楼
早死早超生
7楼2013-05-13 20:35:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhxzzzzzz

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by hnxxring at 2013-05-13 20:34:21
楼主，请问有PHB的图谱和序列吗？我们想换一下载体，了解了一些这个载体的信息，但是找不到图谱和序列，如果有还望楼主能够分享，谢谢

我也没有呢
回复此楼
寻寻觅觅，谁在灯火阑珊处？
8楼2013-09-26 10:09:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

kernim

金虫 (正式写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by hnxxring at 2013-05-13 20:35:00
请问有PHB的图谱和序列吗？我们想换一下载体，了解了一些这个载体的信息，但是找不到图谱和序列，如果有还望楼主能够分享，谢谢

找到原载体图了吗？ 同求
赞一下 回复此楼
9楼2018-03-21 16:16:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 zhxzzzzzz 的主题更新
91/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 科研孤儿太难了 +18 我4大白菜 2026-08-20 19/950 2026-08-24 09:47 by 凯恩广盛催化分�
[基金申请] 能否退出参与的面上项目解除限项 +9 koalala 2026-08-24 9/450 2026-08-24 09:36 by Vivilian
[基金申请] 明天应该可查了！？ +4 chengyan1220 2026-08-23 4/200 2026-08-24 08:47 by gloomy6159
[基金申请] 建议基金发布提前给出明确的时间点 +11 kulium 2026-08-21 14/700 2026-08-24 02:12 by 流流伤
[基金申请] 2026国自然函评费到账 +16 羊腰板 2026-08-21 17/850 2026-08-23 23:02 by tianxiaochun
[基金申请] 让我中一个面上吧！ +12 大萍1987 2026-08-20 15/750 2026-08-23 20:44 by 大萍1987
[基金申请] 今天放榜吗？ +15 布布和一二 2026-08-19 16/800 2026-08-23 09:55 by 张春生
[基金申请] 93BebMhtakh前后11位开头都是大写 +7 且听虎啸 2026-08-17 8/400 2026-08-22 21:55 by 医学老男孩
[基金申请] 只有每年这种时候来逛逛小木虫 +24 yaoyewhu2008 2026-08-20 26/1300 2026-08-22 17:43 by kammury
[基金申请] filecode，4个jtjc了 +13 ziyangfang 2026-08-19 16/800 2026-08-22 17:08 by WH3796
[基金申请] 人气不行了 +8 fansofjerry 2026-08-21 8/400 2026-08-22 16:30 by zyqchem
[基金申请] 今天基金会出结果吗？20260819 +16 kkkl_v 2026-08-19 17/850 2026-08-22 16:12 by 阿布Abu
[基金申请] 时间戳今天，20号变了 +5 archvillain 2026-08-20 5/250 2026-08-22 06:12 by hui_daxiao
[基金申请] 放榜前的不淡定 40+4 snowwithsea 2026-08-19 14/700 2026-08-21 23:51 by cratir
[基金申请] 时间戳又变了 +13 wuchongjun 2026-08-20 19/950 2026-08-21 17:21 by 紫杉醇
[论文投稿] 投稿咨询 +5 wwm09 2026-08-17 7/350 2026-08-21 10:11 by 期刊论文帮手
[基金申请] 今天放榜没戏了吧 +9 yuleib84 2026-08-19 11/550 2026-08-21 10:06 by gltch
[基金申请] 重要消息，中午系统在维护 +11 yuleib84 2026-08-18 12/600 2026-08-20 11:09 by xskun
[基金申请] 朋友圈看到的 +6 wangzilk 2026-08-18 8/400 2026-08-19 10:55 by Haru815
[基金申请] 明天放榜？ +5 Shxjjxjkx 2026-08-18 5/250 2026-08-18 18:14 by -大大大大大-
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭