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qiuling

金虫 (小有名气)

[求助] HPLC柱压突然降低20bar,保留减弱7min,但系统没有泄漏,柱压也稳定,是什么问题导致?

色谱柱:Waters XBridge C18;流动相:磷酸盐和乙腈,梯度变化,乙腈比例从25%到40%,柱温25度。前一天压力为170bar,测定样品正常;第二天柱压就突然降低20bar至150bar,保留从23min减至16min,峰形柱效却无明显变化。经排查,系统没有泄漏,柱压150bar也稳定,没有气泡,样品和流动相等都没有什么问题。是什么原因导致柱压突然降低而保留减弱?如果是柱子坍塌,峰形柱效为何无明显变化?希望高手答疑!非常感谢!
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yuting_li

铁杆木虫 (著名写手)

色谱维修工程师

17楼的童鞋说的有道理。
但是,出问题的往往是缓冲液与乙腈的混合问题。问题出在乙腈通道上,乙腈容易聚合从而附着在比例阀的宝石球上,进而影响比例阀的开关,所以保留时间会出现变化。
    这是因为长期使用乙腈在一个固定通道内造成的。
建议1.养成一个好的使用习惯,使用完乙腈立即用甲醇把乙腈通道的乙腈充分置换出来,不要使乙腈在一个通道内呆的时间长了。
2. 使用一段时间后(不多于一星期),用60~70度的热水清洗乙腈通道和缓冲液的通道。再用纯异丙醇清洗通道。再用水置换。然后就可以各用各的。
有因有果
20楼2013-04-10 22:39:09
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