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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » HPLC柱压突然降低20bar,保留减弱7min，但系统没有泄漏，柱压也稳定，是什么问题导致？
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qiuling

金虫 (小有名气)

[求助] HPLC柱压突然降低20bar,保留减弱7min，但系统没有泄漏，柱压也稳定，是什么问题导致？

色谱柱：Waters XBridge C18；流动相：磷酸盐和乙腈，梯度变化，乙腈比例从25%到40%，柱温25度。前一天压力为170bar，测定样品正常；第二天柱压就突然降低20bar至150bar，保留从23min减至16min，峰形柱效却无明显变化。经排查，系统没有泄漏，柱压150bar也稳定，没有气泡，样品和流动相等都没有什么问题。是什么原因导致柱压突然降低而保留减弱？如果是柱子坍塌，峰形柱效为何无明显变化？希望高手答疑！非常感谢！
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1楼 2013-04-09 14:43:43
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yuting_li

铁杆木虫 (著名写手)

色谱维修工程师
17楼的童鞋说的有道理。
但是，出问题的往往是缓冲液与乙腈的混合问题。问题出在乙腈通道上，乙腈容易聚合从而附着在比例阀的宝石球上，进而影响比例阀的开关，所以保留时间会出现变化。
    这是因为长期使用乙腈在一个固定通道内造成的。
建议1.养成一个好的使用习惯，使用完乙腈立即用甲醇把乙腈通道的乙腈充分置换出来，不要使乙腈在一个通道内呆的时间长了。
2. 使用一段时间后（不多于一星期），用60~70度的热水清洗乙腈通道和缓冲液的通道。再用纯异丙醇清洗通道。再用水置换。然后就可以各用各的。
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有因有果
20楼2013-04-10 22:39:09
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djjreal

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
qiuling: 金币+2, ★有帮助 2013-04-10 10:49:05
不知道你的液相具体发生了什么，如果只是两天比较的话，你看看在你做之前是不是做过什么，系统没有充分平衡也有可能造成柱压跟保留时间变化，保留时间改变那么多？两天的流动相是不是同一瓶的
我倒是有个问题，梯度的柱压在25%到40%的过程中保持不变的吗？
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2楼2013-04-10 09:56:08
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cpuliuwei

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
qiuling: 金币+2, ★有帮助 2013-04-10 10:49:42
泵流量不准或有机相的那个泵流量不准，一般是轻微污染了。
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3楼2013-04-10 10:15:44
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qiuling

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by djjreal at 2013-04-10 09:56:08
不知道你的液相具体发生了什么，如果只是两天比较的话，你看看在你做之前是不是做过什么，系统没有充分平衡也有可能造成柱压跟保留时间变化，保留时间改变那么多？两天的流动相是不是同一瓶的
我倒是有个问题，梯度 ...

流动相是同一瓶，系统充分平衡。两天之间这根柱子没有做过其他的试验。我提到的柱压变化指的是25%时的压力变化（两天之间），40%是随着梯度变化的，在这我就没提了。谢谢您！
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4楼2013-04-10 10:48:55
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