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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 环境 » 环境生态 » 碱性磷酸酶测定
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smile未央

新虫 (初入文坛)

[求助] 碱性磷酸酶测定

现在在测定陶粒基质里的碱性磷酸酶活性，求具体的磷酸苯二钠测定方法。我看了关松荫老师的土壤酶及其研究方法还有土壤微生物分析方法手册，但是不够具体啊……比如磷酸苯二钠用缓冲液配制，是用什么缓冲液呢？几个方法里略有不同。所以请做过的前辈指教一下。
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宁静致远
1楼 2013-04-09 12:24:32
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taojia7560

木虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by smile未央 at 2013-07-18 10:01:00
有具体的对硝基苯酚法么？我看外文里面多用这种方法。但是缓冲液的配制方法一直没找到。。。。...

楼主，请教个问题，碱性磷酸酶没测定时需要设置无基质对照吗？
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平凡
4楼2014-08-20 23:20:19
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leisure797

铁杆木虫 (职业作家)

百里登风

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
smile未央: 金币+5, ★★★很有帮助 2013-07-18 09:59:37
有很多种，我国曾应用较广的为磷酸苯二钠比色法，但现在应用较多的是连续检测法。
原理为以磷酸对硝基酚为底物，2-氨基-2-甲基-1-丙醇或二乙醇胺为磷酸酰基的受体。在碱性环境下，ALP催化4-NPP水解产生游离的对硝基酚，在碱性溶液中转变成黄色。根据405nm处吸光度增高速率来计算ALP活性单位。
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笑一个！
2楼2013-04-09 14:30:07
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smile未央

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by leisure797 at 2013-04-09 14:30:07
有很多种，我国曾应用较广的为磷酸苯二钠比色法，但现在应用较多的是连续检测法。
原理为以磷酸对硝基酚为底物，2-氨基-2-甲基-1-丙醇或二乙醇胺为磷酸酰基的受体。在碱性环境下，ALP催化4-NPP水解产生游离的对硝基 ...

有具体的对硝基苯酚法么？我看外文里面多用这种方法。但是缓冲液的配制方法一直没找到。。。。
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宁静致远
3楼2013-07-18 10:01:00
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