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st.nova2012

新虫 (小有名气)

[求助] agilent 6410杂峰,重现性差

仪器是1200HPLC配的6410MS

现在有两个问题:1,第二个物质的主峰后面拖了一系列小峰,有4~5个之多,这是怎么回事?怎么消除?

2,峰面积和峰高的重现性差,波动很大

我用的是水和乙腈(35-65),各含0.1%的甲酸,现在怀疑流动相的甲酸是不是挥发了,引起比例误差?或者,柱温箱的盖子没盖上,温度波动(室内温度应该是比较稳定的)

请问大家怎么处理?
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user53900

木虫 (正式写手)

知易行难,实验的真谛

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
crity328: 金币+1, 感谢交流,欢迎常来~ 2013-04-08 18:06:03
我觉得,楼主应该配一个等度的流动相,就是把流动相放在一个瓶子里面,加甲酸混匀,抽滤,脱气,用一个泵来做,如果不是梯度洗脱的话,最好用一个泵来做试验,这样就稳定些
我们已经走的太远,以至于忘了为什么而出发
4楼2013-04-08 16:04:24
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empore

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
crity328: 金币+2, 感谢交流,欢迎常来~ 2013-04-08 18:05:46
1、第二个主峰后的小峰?是原来就有的么?还是就这次有的?如果原来没有,那有可能是引入的杂质,清洗进样系统和重配样品,看看你的水合乙腈是否是原来用的。
2、波动很大是多大?10%20?30?保留时间是否有波动,柱温一般会影响保留时间,保留时间不同,峰高会有所不同,但应该不会很大,而且峰面积应该不会波动很大。如果保留时间不变,峰高波动,那可能是你的进样系统出了问题,可以自己做简单的清洗,排气泡等操作;如还是不能解决,联系厂家检查进样器。
另,甲酸挥发应该会影响保留时间和分离度
如是我闻
2楼2013-04-08 11:29:08
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st.nova2012

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by empore at 2013-04-08 11:29:08
1、第二个主峰后的小峰?是原来就有的么?还是就这次有的?如果原来没有,那有可能是引入的杂质,清洗进样系统和重配样品,看看你的水合乙腈是否是原来用的。
2、波动很大是多大?10%20?30?保留时间是否有波动, ...

峰面积的波动在20%~30%之间
3楼2013-04-08 14:45:00
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st.nova2012

新虫 (小有名气)

多谢大家的回复,现在已经稳定了,pg级别的量,做出来RSD不超过4%,应该还可以了

我觉得可能是新柱平衡时间不够,联系用了一天,峰面积和峰高就基本稳定下来了
5楼2013-04-10 10:28:16
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