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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 质粒双酶切BSA怎么加？
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意孤城_

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
BSA 50ul体系加上0.5ul 足够了
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11楼2013-04-08 11:17:58
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Leo_xin

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
K+BSA  估计你用的TAKARA公司的酶。

buffer一般是10乘的，BSA一般是100乘的，所以你最后体系里肯定把这两个稀释成1乘。

双酶切的话要看这两种酶的最适温度，buffer是不是一样，如果一样就直接把两种酶一起加。总酶量最好小于体系的10%

如果buffer不一样，那就得加完一种酶后一段时间  过柱回收再加第二种酶（换buffer）

如果温度不一样，buffer一样，那就先加一个酶 一段时间后，  可以选择灭活下  加下一个酶（不用换buffer）
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还有太多地方值得改进。
12楼2013-04-08 12:47:49
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aeo22

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
如果是takara的商品，BSA是当它10X来用的
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13楼2013-04-09 01:23:35
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bioyujun

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
引用回帖:
8楼: Originally posted by wanglei512 at 2013-04-08 08:44:48
NcoⅠ         0.5   UL      
XhoⅠ         0.5   UL
buffer K        2    UL
BSA             2    UL
DNA            <1ug
水              补至20ul
这是TAKARA的酶切

正解，我就这么做没问题

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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14楼2013-04-10 07:51:20
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蜗牛的速度

禁虫 (初入文坛)
本帖内容被屏蔽
15楼2018-04-01 13:51:36
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787588366
16楼2020-06-04 13:15:16
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