应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 质粒双酶切BSA怎么加？
52/1返回列表
查看: 9403  |  回复: 15
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

小虫子MM

铜虫 (初入文坛)

[求助] 质粒双酶切BSA怎么加？

各位同学，我做的是双酶切，用NcoⅠ和XhoⅠ俩个酶，用的BUFFER写的是1×K+BSA，请问一下这个酶切体体系是什么啊？BSA加多少量啊？比如我总体系想切5μL！请同学们帮忙知道下！以前没加BSA的酶切体系如下：质粒3uL，水：1uL，buffer：0.5uL，酶各0.25uL！
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2013-04-07 12:58:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bioyujun

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
引用回帖:
8楼: Originally posted by wanglei512 at 2013-04-08 08:44:48
NcoⅠ         0.5   UL      
XhoⅠ         0.5   UL
buffer K        2    UL
BSA             2    UL
DNA            <1ug
水              补至20ul
这是TAKARA的酶切

正解，我就这么做没问题

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
赞一下(1人) 回复此楼
14楼2013-04-10 07:51:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 16 个回答

shangrila911

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 鼓励应助，分子生物版块，期待你的精彩。 2013-04-07 13:47:03
小虫子MM: 金币+1, ★有帮助 2013-04-11 17:36:25
K+BSA  是一种反应缓冲液 是成品  不是自己可以分开加的
赞一下 回复此楼
一切都会好的!
2楼2013-04-07 13:40:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小虫子MM

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by shangrila911 at 2013-04-07 13:40:30
K+BSA  是一种反应缓冲液 是成品  不是自己可以分开加的

我们买的酶，比如XhoⅠ，袋里就带有0.1%的BSA啊
赞一下 回复此楼
3楼2013-04-07 14:52:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

auroraA

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小虫子MM: 金币+2, ★有帮助 2013-04-11 17:34:41
如果你是做克隆的话,建议你根本就不要加BSA,因为BSA虽然可降低star activity,但是也影响activity. 一般1-2ug的plasmid, 1ul (10u/ul)enzyme, 1hr-1.5hr足够了
赞一下 回复此楼
4楼2013-04-07 15:00:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 16 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭