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wocause

银虫 (小有名气)

[求助] PCR引物

CO1通用引物扩增不条带怎么办啊?是不是得重新设计引物啊?怎么设计啊?测序引物和PCR引物有什么区别啊?新手跪求指导!DNA条形码到底是怎样的一个流程?质粒的重组转化有意义么?
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可乐汀

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【答案】应助回帖

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myprayer: 金币+2, 赠人玫瑰手有余香。生物版块欢迎你的无私奉献。 2013-04-07 12:09:36
你是做的动物样品吗?我之前遇到过,首先通用引物不成功的时候要确定样品的质量,处理是否合格。
其次改变样品浓度,防止因浓度太高或太低扩增不出条带。
如果其他问题都排除的话,只能考虑换引物,另一对F1-1和R1-1的引物试过没有?可以尝试一下。
还不行就只能设计引物了,之前德国有家网站免费帮设计,国内也有设计的公司,不过价格比较高,你是哪里的?
2楼2013-04-07 09:16:44
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wocause

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 可乐汀 at 2013-04-07 09:16:44
你是做的动物样品吗?我之前遇到过,首先通用引物不成功的时候要确定样品的质量,处理是否合格。
其次改变样品浓度,防止因浓度太高或太低扩增不出条带。
如果其他问题都排除的话,只能考虑换引物,另一对F1-1和R ...

成都中医药大学的。不能自己设计引物么?从Genebank 上下载了同属的CO1序列。能自己设计出它们专属的CO1引物吗?
3楼2013-04-07 10:00:49
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可乐汀

捐助贵宾 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by wocause at 2013-04-07 10:00:49
成都中医药大学的。不能自己设计引物么?从Genebank 上下载了同属的CO1序列。能自己设计出它们专属的CO1引物吗?...

我没自己设计过。。当时在北京做的时候联系过一个公司,需要的话我给你找找电话再~~
4楼2013-04-07 10:46:34
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pengwenbo

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
下面是关于PCR引物设计的书,借鉴一下,反正这是一项要学习的技术,希望对你有帮助!

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………………………………
5楼2013-04-07 13:22:02
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wocause

银虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by pengwenbo at 2013-04-07 13:22:02
下面是关于PCR引物设计的书,借鉴一下,反正这是一项要学习的技术,希望对你有帮助!

能给中文版的吗???英语水平有限,估计毕业了那书也看不完
6楼2013-04-07 14:36:15
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aeo22

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
设计引物是很基本的技能啊,无外乎那几个原则,既然都有基因的序列,何不自己捣鼓捣鼓
7楼2013-04-09 01:35:20
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