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wocause

银虫 (小有名气)

[求助] PCR引物

CO1通用引物扩增不条带怎么办啊?是不是得重新设计引物啊？怎么设计啊？测序引物和PCR引物有什么区别啊？新手跪求指导！DNA条形码到底是怎样的一个流程？质粒的重组转化有意义么？
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1楼 2013-04-06 23:29:09
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可乐汀

捐助贵宾 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+2, 赠人玫瑰手有余香。生物版块欢迎你的无私奉献。 2013-04-07 12:09:36
你是做的动物样品吗？我之前遇到过，首先通用引物不成功的时候要确定样品的质量，处理是否合格。
其次改变样品浓度，防止因浓度太高或太低扩增不出条带。
如果其他问题都排除的话，只能考虑换引物，另一对F1-1和R1-1的引物试过没有？可以尝试一下。
还不行就只能设计引物了，之前德国有家网站免费帮设计，国内也有设计的公司，不过价格比较高，你是哪里的？
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2楼2013-04-07 09:16:44
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wocause

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 可乐汀 at 2013-04-07 09:16:44
你是做的动物样品吗？我之前遇到过，首先通用引物不成功的时候要确定样品的质量，处理是否合格。
其次改变样品浓度，防止因浓度太高或太低扩增不出条带。
如果其他问题都排除的话，只能考虑换引物，另一对F1-1和R ...

成都中医药大学的。不能自己设计引物么？从Genebank 上下载了同属的CO1序列。能自己设计出它们专属的CO1引物吗？
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3楼2013-04-07 10:00:49
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可乐汀

捐助贵宾 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by wocause at 2013-04-07 10:00:49
成都中医药大学的。不能自己设计引物么？从Genebank 上下载了同属的CO1序列。能自己设计出它们专属的CO1引物吗？...

我没自己设计过。。当时在北京做的时候联系过一个公司，需要的话我给你找找电话再~~
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4楼2013-04-07 10:46:34
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pengwenbo

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
下面是关于PCR引物设计的书，借鉴一下，反正这是一项要学习的技术，希望对你有帮助！
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………………………………
5楼2013-04-07 13:22:02
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wocause

银虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by pengwenbo at 2013-04-07 13:22:02
下面是关于PCR引物设计的书，借鉴一下，反正这是一项要学习的技术，希望对你有帮助！

能给中文版的吗？？？英语水平有限，估计毕业了那书也看不完
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6楼2013-04-07 14:36:15
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aeo22

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
设计引物是很基本的技能啊，无外乎那几个原则，既然都有基因的序列，何不自己捣鼓捣鼓
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7楼2013-04-09 01:35:20
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