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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 请教测序的问题，很急切
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zhouni923219

铜虫 (正式写手)

[交流] 请教测序的问题，很急切 已有8人参与

各位大虾好，我有关于测序的问题，没做PCR，仅仅是把一段已测过序的500bp左右的DNA序列酶切下来，不做任何改变，再连接到有同样的酶切位点的另外一个载体上，转化后，做了酶切鉴定，连接成功了，那么还需要做测序吗？因为不知道酶切连接过程会不会有基因突变的情况。
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坚持，加油！
1楼 2013-04-06 13:59:08
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alarace

至尊木虫 (知名作家)
★ ★ ★
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gyesang: 金币+2, 个人经验也是这样的，鼓励交流经验！ 2013-04-27 21:18:26
不用再测序了，酶切连接不会导致突变的。
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2楼2013-04-06 14:49:03
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zhouni923219

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by alarace at 2013-04-06 14:49:03
不用再测序了，酶切连接不会导致突变的。

谢谢指导！
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坚持，加油！
3楼2013-04-06 15:05:41
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huguangdong

至尊木虫 (职业作家)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
这种情况只要第一次测序正常，一般不用测序，但是如果你胶回收用了EB建议保险起见还是测一下，可能会有突变，但概率很低。
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4楼2013-04-06 16:42:51
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fuding6

木虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
其实，挑2个克隆，还是去测序吧，也就一个反应。测序期间后续的实验继续做，不耽误。
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5楼2013-04-07 04:21:51
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siyianhong

银虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
明确的说，不用测，放心接着往下做吧。

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6楼2013-04-07 06:09:54
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ganchao1776

至尊木虫 (职业作家)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
需要测序的，因为在整个过程中你用紫外灯照过了，还是有突变的机会的
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7楼2013-04-07 08:05:00
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nmhsd

木虫 (正式写手)
★
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要测序 虽不知道如何造成的 但却实还会突变 你可以一边做着一边送公司测序 两不耽误

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8楼2013-04-07 09:46:40
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qqxs

木虫 (正式写手)
★
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莫纠结，酶切连接不会出现基因突变的
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9楼2013-04-07 12:02:03
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yuguiyan

至尊木虫 (文坛精英)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我测过连表达载体的，乱七八糟！所以不用测了
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10楼2013-04-08 21:45:28
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