应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » PCR杂带
51/1返回列表
查看: 657  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

jose123

铜虫 (初入文坛)

[求助] PCR杂带

最近抽提了鱼的组织肝脏、脾脏、头肾和血液的RNA，做溶菌酶基因的半定量PCR，设计了好几对引物（all none），奇怪的是：
在肝脏中只有一条目的带，其他组织中均有2条带。不知什么原因，求解释啊，新手金币不足，见谅！！！

222.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2013-04-04 19:50:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jose123

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-04-05 23:32:39
引物二聚体一般是比你跑出来的稍微小一点，所以我不好区分是否是引物二聚体或者是非特异性。丰度高的活说明模板浓度高，形成引物二聚体或者引物与其他非特异性结合的几率降低。...

谢谢！
回复此楼
5楼2013-04-05 23:48:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励应助！ 2013-04-05 13:25:52
下面的那条带可能是引物二聚体或者非特异扩增。感觉是你的基因在肝脏里面丰度高，所以P出来很亮的一条带。其他组织里面少，所以产生非特异扩增或者形成大量引物二聚体。
赞一下 回复此楼
2楼2013-04-05 00:28:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jose123

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-04-05 00:28:22
下面的那条带可能是引物二聚体或者非特异扩增。感觉是你的基因在肝脏里面丰度高，所以P出来很亮的一条带。其他组织里面少，所以产生非特异扩增或者形成大量引物二聚体。

dimer的可能性感觉很小，因为多出的条带还是比较大的，差不多100bp。应该也可以排除引物的问题。至于非特异性，我也跑了梯度，那条带还是消除不了。（感觉是你的基因在肝脏里面丰度高，所以P出来很亮的一条带。为什么丰度高就不会有非特异性？）
赞一下 回复此楼
3楼2013-04-05 21:58:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
jose123: 金币+4, ★有帮助 2013-04-05 23:53:13
引用回帖:
3楼: Originally posted by jose123 at 2013-04-05 21:58:21
dimer的可能性感觉很小，因为多出的条带还是比较大的，差不多100bp。应该也可以排除引物的问题。至于非特异性，我也跑了梯度，那条带还是消除不了。（感觉是你的基因在肝脏里面丰度高，所以P出来很亮的一条带。为什 ...

引物二聚体一般是比你跑出来的稍微小一点，所以我不好区分是否是引物二聚体或者是非特异性。丰度高的活说明模板浓度高，形成引物二聚体或者引物与其他非特异性结合的几率降低。
赞一下 回复此楼
4楼2013-04-05 23:32:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 求调剂 +4 不会飞的鱼@ 2026-04-10 4/200 2026-04-10 13:29 by wp06
[考研] 中科院总分315求调剂 +6 lallalh 2026-04-09 6/300 2026-04-10 13:28 by moonboat
[考研] 298求调剂 +11 钉叮咚冬瓜 2026-04-09 11/550 2026-04-10 13:27 by asy1wn
[考研] 材料调剂 +13 一样YWY 2026-04-04 13/650 2026-04-10 11:07 by mattzhming
[考研] 22408 352分求调剂0854类 +3 努力的夏末 2026-04-09 3/150 2026-04-10 10:12 by 314126402
[考研] 085501机械英二77总分294求调剂，接受跨专业学习 +6 守法公民亓纪 2026-04-08 6/300 2026-04-09 15:55 by wp06
[考研] 0860004 求调剂 309分 +6 Yin DY 2026-04-09 6/300 2026-04-09 10:19 by 啊李999
[考研] 专硕0854初试考材科基，求调剂 +7 3220548044 2026-04-06 10/500 2026-04-08 21:59 by hypershenger
[考研] 机械工程313分找工科调剂 +3 双一流本科机械 2026-04-08 3/150 2026-04-08 20:41 by 土木硕士招生
[考研] 298求调剂 +4 manman511 2026-04-05 4/200 2026-04-08 16:50 by tjzhao
[考研] 298求调剂 +4 残荷新柳 2026-04-07 4/200 2026-04-07 23:02 by lbsjt
[考研] 软工学硕299求调剂 +6 useryy 2026-04-07 6/300 2026-04-07 09:50 by vgtyfty
[考研] 26自然地理学303分求调剂 +4 一战成硕啊啊啊� 2026-04-06 9/450 2026-04-06 20:35 by lin-da
[考研] 071000生物学调剂 +7 拉提桃 2026-04-06 7/350 2026-04-06 18:55 by 52305043001
[考研] （调剂）一志愿报考哈尔滨工业大学0857资源与环境专业378分考生 +7 狠狠加油 2026-04-05 8/400 2026-04-06 16:52 by momo皓
[考研] 081200-11408-276学硕求调剂 +5 崔wj 2026-04-05 5/250 2026-04-06 15:40 by lin-da
[考研] 332求调剂 +17 小小孟... 2026-04-05 18/900 2026-04-06 09:51 by 蓝云思雨
[考研] 085500机械专硕初试288求调剂 +3 GZJguo666- 2026-04-05 3/150 2026-04-05 18:06 by jkddd
[考研] 328分调剂 +6 门men 2026-04-04 6/300 2026-04-05 13:40 by imissbao
[考研] 266求调剂 +8 学员97LZgn 2026-04-03 8/400 2026-04-04 09:02 by 20021109
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭