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1楼 2013-04-03 16:59:34

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auroraA

铁虫 (初入文坛)

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1949stone: 金币+2, 不错 2013-04-06 09:18:28

除非你的primer有问题,或者DNA template 不好,否则看样子就一条路,你就涨annealing temperature吧,而且还要涨不少. template不要加多了,越多约不好.PCR很灵敏,条件合适的话,枪尖上沾点,都不用有准确体积就够了

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8楼2013-04-04 15:28:59

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chenguestc

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1949stone: 金币+2, 很好地回答 2013-04-06 09:18:39

扩增弥散，说明，模板太多或者退火温度太低，或者引物不特异，请根据情况，减少模板用量，提高退火温度试试，如果不行就换引物，每次试验尽量加上阴阳对照否则不好分析。。。。。。

7楼2013-04-04 07:56:31

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yangcongcong

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1.DNA质量不行 2.反应体系很不合理 3循环数减少10次
人工提DNA很可能是1，要是试剂盒那就2了，可能性很多，一步步联系吧，很正常

己所不欲勿施于人

9楼2013-04-05 09:06:07

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猪小晨

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1949stone: 金币+1, MAYBE 2013-04-06 09:24:48

你用低电压长时间跑一下电泳我也不太清楚但是这样跑的效果都不错

10楼2013-04-05 09:22:53

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守好我的道

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gyesang: 金币+2, 鼓励回帖应助！ 2013-04-27 21:23:36

实验好像是：先提取基因组DNA，再以此为模板，进行PCR的操作。
个人建议：一步一步的确认实验。
首先,基因组DNA的提取，个人建议你做一个浓度低一点的琼脂糖胶，争取能让基因组能够跑出孔，以便与确认基因组的提取效果。个人感觉，你的提取结果不算好，有杂带。同时，PCR的结果不特异，也应该反思第一步的实验。个人建议，用好的基因组提取试剂盒再试一试。

16楼2013-04-05 15:00:23

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gissingtan

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帮帮忙不知道下一步实验怎么做了

2楼2013-04-03 17:00:34

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xshe

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pcr应该是没结果的，没结果很正常的，重P吧，感觉质粒提的可能浓度也不算太高

3楼2013-04-03 18:10:26

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你用多少微升体系？以前我用50的老做不出来，要么各种杂带。换成25的就好做多了。

4楼2013-04-03 18:13:02

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摸摸PCR的条件温度和时间等等，优化一下体系配置

☆☆☆想开了，便能走出去☆☆☆

5楼2013-04-03 21:07:52

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PCR没做出来。对提取的DNA模板是否消化了RNA，用了多少模板？