【答案】应助回帖

» 猜你喜欢

PRMT5·MTA 抑制剂 MRTX1719 的科研应用已经有0人回复
SW033291 科研使用解析：分子特征、储存与实验获取要点已经有0人回复
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费? 已经有283人回复
泛 RAS 抑制新思路：大环肽拟似物如何同时牵住突变型与野生型 RAS？已经有0人回复
TYK2/JAK1 双靶点工具化合物 Brepocitinib：激酶选择性、研究进展与实验应用全解析已经有0人回复
矢车菊素-3-O-葡萄糖苷质控实录：从一张HPLC图谱读懂纯度与稳定性已经有0人回复
恩诺沙星（Enrofloxacin）科研解析：分子特征、LC-MS/MS 检测与实验室使用要点已经有0人回复
Calderasib理化性质与实验操作技术笔记已经有0人回复
RMC-6291怎么用？RAS(ON) 三重复合物工具化合物的实验室实操要点已经有0人回复
苯并呋咱全解析：NBD 荧光衍生化试剂母核的化学特性与实验室应用已经有0人回复
生物质炭与活化剂氢氧化钾混合注意事项已经有0人回复

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

1楼 2013-04-03 16:59:34

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

auroraA

铁虫 (初入文坛)

应助: 21 (小学生)
金币: 459
红花: 2
帖子: 45
在线: 70.4小时
虫号: 2397266
注册: 2013-04-03
专业: 细胞物质运输

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
1949stone: 金币+2, 不错 2013-04-06 09:18:28

除非你的primer有问题,或者DNA template 不好,否则看样子就一条路,你就涨annealing temperature吧,而且还要涨不少. template不要加多了,越多约不好.PCR很灵敏,条件合适的话,枪尖上沾点,都不用有准确体积就够了

赞一下(3人)

8楼2013-04-04 15:28:59

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

chenguestc

木虫 (职业作家)

MolEPI: 7
应助: 576 (博士)
贵宾: 0.4
金币: 4526.9
散金: 1639
红花: 176
帖子: 4708
在线: 353.5小时
虫号: 1337860
注册: 2011-07-05
性别: GG
专业: 作物分子育种

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
1949stone: 金币+2, 很好地回答 2013-04-06 09:18:39

扩增弥散，说明，模板太多或者退火温度太低，或者引物不特异，请根据情况，减少模板用量，提高退火温度试试，如果不行就换引物，每次试验尽量加上阴阳对照否则不好分析。。。。。。

7楼2013-04-04 07:56:31

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

yangcongcong

木虫 (小有名气)

应助: 1 (幼儿园)
金币: 1784.8
帖子: 196
在线: 19.3小时
虫号: 1226240
注册: 2011-03-09
性别: GG
专业: 园林学

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
1949stone: 金币+2, 鼓励 2013-04-06 09:18:49

1.DNA质量不行 2.反应体系很不合理 3循环数减少10次
人工提DNA很可能是1，要是试剂盒那就2了，可能性很多，一步步联系吧，很正常

己所不欲勿施于人

9楼2013-04-05 09:06:07

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

猪小晨

新虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 9.5
帖子: 4
在线: 43分钟
虫号: 2400637
注册: 2013-04-04
专业: 微生物生理与生物化学

★
1949stone: 金币+1, MAYBE 2013-04-06 09:24:48

你用低电压长时间跑一下电泳我也不太清楚但是这样跑的效果都不错

10楼2013-04-05 09:22:53

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

守好我的道

新虫 (初入文坛)

应助: 10 (幼儿园)
金币: 136.5
帖子: 15
在线: 15.9小时
虫号: 2357237
注册: 2013-03-18
专业: 生物大分子结构与功能

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖应助！ 2013-04-27 21:23:36

实验好像是：先提取基因组DNA，再以此为模板，进行PCR的操作。
个人建议：一步一步的确认实验。
首先,基因组DNA的提取，个人建议你做一个浓度低一点的琼脂糖胶，争取能让基因组能够跑出孔，以便与确认基因组的提取效果。个人感觉，你的提取结果不算好，有杂带。同时，PCR的结果不特异，也应该反思第一步的实验。个人建议，用好的基因组提取试剂盒再试一试。

16楼2013-04-05 15:00:23

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

普通回帖

gissingtan

新虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 148
帖子: 15
在线: 19.9小时
虫号: 2341070
注册: 2013-03-12
专业: 植物生理与生化

帮帮忙不知道下一步实验怎么做了

2楼2013-04-03 17:00:34

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

xshe

新虫 (初入文坛)

应助: 3 (幼儿园)
金币: 160.3
帖子: 38
在线: 8.8小时
虫号: 2336643
注册: 2013-03-11
专业: 生物化学

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
1949stone: 金币+1, MAYBE 2013-04-06 09:24:32

pcr应该是没结果的，没结果很正常的，重P吧，感觉质粒提的可能浓度也不算太高

3楼2013-04-03 18:10:26

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

q317476148

铁杆木虫 (著名写手)

喵星人

应助: 157 (高中生)
贵宾: 0.011
金币: 6055.6
散金: 2067
红花: 46
沙发: 3
帖子: 1967
在线: 2526小时
虫号: 1559925
注册: 2012-01-02
性别: MM
专业: 药物化学

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 鼓励应助，分子生物版块，期待你的精彩。 2013-04-06 12:18:25

你用多少微升体系？以前我用50的老做不出来，要么各种杂带。换成25的就好做多了。

4楼2013-04-03 18:13:02

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

Rick001

铁杆木虫 (职业作家)

钓鱼岛环保首席秘书

应助: 295 (大学生)
金币: 5751
散金: 1087
红花: 47
帖子: 3149
在线: 705.4小时
虫号: 407112
注册: 2007-06-19
性别: MM
专业: 资源化工

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1

摸摸PCR的条件温度和时间等等，优化一下体系配置

☆☆☆想开了，便能走出去☆☆☆

5楼2013-04-03 21:07:52

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

MolEPI: 10
应助: 1662 (讲师)
金币: 8693.8
红花: 72
帖子: 3516
在线: 456小时
虫号: 1614001
注册: 2012-02-13
专业: 生物化学

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
1949stone: 金币+1, 鼓励讨论 2013-04-06 09:25:19

PCR没做出来。对提取的DNA模板是否消化了RNA，用了多少模板？