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HPLC 流动相的操作
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chenhw06
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[交流]
HPLC 流动相的操作
请问大家,HPLC流动相是4:1的乙腈和水。之前都是先混合再过滤超声到一个瓶子,这次想省事,就分别过滤用两个瓶子装着,然后将设置A(乙腈)管道80%,B(水)管道20%,混合。(两者混合的时候应该会产生起泡,对柱子什么有没有影响?)你们一般都是怎么做的呐?
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2013-04-02 00:03:08
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chenhw06
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9楼
:
Originally posted by
akosrios
at 2013-04-02 09:51:40
用的什么色谱柱
如果是反相柱,80%的乙腈洗脱太强,从图上看楼主的物质几乎没有保留,适当降低乙腈比例,或者使用梯度洗脱
另外,尽量用流动相或者水相溶解样品,不要用纯乙腈,容易有溶剂效应影响峰型...
用的C8柱,因为溶质不溶于水,所以用纯乙腈溶的。乙腈跟水的配比是在小木虫上查的,因为没有文献提到。我现在去调成3:1和2:1试一下。不过不用流动相溶解样品应该没有很大问题吧?因为我前面做的一批实验都是用乙腈定容的,现在要是改成流动相,样品检测就木办法了。
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10楼
2013-04-02 10:00:24
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2013-04-02 10:27:31
如果使用前乙腈和水都超声脱气了,这样做是没有问题的,不过不知道你是哪个型号的机子,最好把机子的在线脱气提前打开,in case。
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2楼
2013-04-02 07:42:05
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2013-04-02 10:27:35
你的仪器有在线脱气机吗?有的话就不用担心 没有的话还是要分别脱气 减少混合时的气泡量 另外流动相不要放在温度高的地方和阳光直射的地方
[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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3楼
2013-04-02 07:45:33
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chenhw06
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2楼
:
Originally posted by
BUU-2011
at 2013-04-02 07:42:05
如果使用前乙腈和水都超声脱气了,这样做是没有问题的,不过不知道你是哪个型号的机子,最好把机子的在线脱气提前打开,in case。
使用前都超声了,用的是Waters 2695.在线脱气一直都是开着的。不过的色谱图不知道怎么回事是这样的?是纯品,准备做标曲的,这个到底是什么情况啊?
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4楼
2013-04-02 09:40:23
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