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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » HPLC 流动相的操作
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chenhw06

金虫 (正式写手)

[交流] HPLC 流动相的操作

请问大家，HPLC流动相是4：1的乙腈和水。之前都是先混合再过滤超声到一个瓶子，这次想省事，就分别过滤用两个瓶子装着，然后将设置A（乙腈）管道80%，B（水）管道20%，混合。（两者混合的时候应该会产生起泡，对柱子什么有没有影响？）你们一般都是怎么做的呐？
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1楼 2013-04-02 00:03:08
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chenhw06

金虫 (正式写手)
引用回帖:
9楼: Originally posted by akosrios at 2013-04-02 09:51:40
用的什么色谱柱

如果是反相柱，80%的乙腈洗脱太强，从图上看楼主的物质几乎没有保留，适当降低乙腈比例，或者使用梯度洗脱

另外，尽量用流动相或者水相溶解样品，不要用纯乙腈，容易有溶剂效应影响峰型...

用的C8柱，因为溶质不溶于水，所以用纯乙腈溶的。乙腈跟水的配比是在小木虫上查的，因为没有文献提到。我现在去调成3：1和2:1试一下。不过不用流动相溶解样品应该没有很大问题吧?因为我前面做的一批实验都是用乙腈定容的，现在要是改成流动相，样品检测就木办法了。
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10楼2013-04-02 10:00:24
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BUU-2011

木虫 (小有名气)
★ ★
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chenhw06: 金币+1 2013-04-02 10:27:31
如果使用前乙腈和水都超声脱气了，这样做是没有问题的，不过不知道你是哪个型号的机子，最好把机子的在线脱气提前打开，in case。
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2楼2013-04-02 07:42:05
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wy1518

金虫 (正式写手)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
chenhw06: 金币+1 2013-04-02 10:27:35
你的仪器有在线脱气机吗？有的话就不用担心 没有的话还是要分别脱气 减少混合时的气泡量 另外流动相不要放在温度高的地方和阳光直射的地方

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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3楼2013-04-02 07:45:33
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chenhw06

金虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by BUU-2011 at 2013-04-02 07:42:05
如果使用前乙腈和水都超声脱气了，这样做是没有问题的，不过不知道你是哪个型号的机子，最好把机子的在线脱气提前打开，in case。

使用前都超声了，用的是Waters 2695.在线脱气一直都是开着的。不过的色谱图不知道怎么回事是这样的？是纯品，准备做标曲的，这个到底是什么情况啊？
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4楼2013-04-02 09:40:23
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