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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 存档旧帖 » PCR小白，请教个关于NCBI的问题
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zs416

铁虫 (小有名气)

[求助] PCR小白，请教个关于NCBI的问题

PCR小白一枚，不会设计引物，想在NCBI上找个文章中的现成引物。已经在NCBI上找到该基因了，但是，不知道怎么由基因的同源序列那里反过去查文章，请高手们教教我。
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实验顺利
1楼 2013-03-30 16:01:13
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liyu0355

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
zs416(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖应助！ 2013-05-31 16:54:06
把其他物种上查到的该基因的保守序列输入到Primer中.
设计引物,进行扩增你的目的片段.
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4楼2013-04-02 10:50:40
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liyu0355

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
这个设计需要相关软件的,不知你有没有相关软件呢?
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2楼2013-03-30 18:53:37
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zs416

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by liyu0355 at 2013-03-30 18:53:37
这个设计需要相关软件的,不知你有没有相关软件呢?

下了Primer5.0,但是用的还不熟练。想请问一下，我要用PCR扩增DNA的某个基因的保守序列，前提是我不知道我研究的材料的该基因的序列，如果用Primer5.0设计引物的时候，我是不是该把我在其他物种上查到的该基因的保守序列输入到Primer中呢？
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实验顺利
3楼2013-04-01 23:06:11
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奇怪人生123

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
zs416(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖应助！ 2013-05-31 16:54:14
多个物种的相似功能基因进行比对，可以是基因序列比对，蛋白比对的话更好。如果是蛋白比对，挑选保守性高的位点设计简并引物，以你的菌种为模板，进行简并PCR。
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实时荧光定量PCR（TaqMan探针法）欢迎和大家探讨~
5楼2013-04-02 16:39:17
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