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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 同位素法测DNA聚合酶酶活的原理
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fhda142

铜虫 (小有名气)

[求助] 同位素法测DNA聚合酶酶活的原理

哪位大神能解说下同位素法测DNA聚合酶酶活的方法和原理~3q
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1楼 2013-03-27 20:10:57
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zhenwuhuang

至尊木虫 (文学泰斗)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
myprayer: 金币+2, 赠人玫瑰手有余香。鼓励应助 2013-04-04 11:10:36
fhda142: 金币+2, ★有帮助, 谢谢啦，我要找的是用放射性同位素测的方法，这个不是的~~~· 2013-04-14 18:49:06
看看是不是这个。http://file.lw23.com/d/dc/dc7/dc ... bb-af4c962a1b5a.pdf
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2楼2013-04-03 17:26:05
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fdbxlu
3楼2013-04-04 12:50:03
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361936233

金虫 (小有名气)
我也想知道，求教
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呵呵
4楼2013-04-04 13:29:47
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丿花落丶小兔

铁杆木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★
fhda142: 金币+2, 谢谢参与！不过没看懂。。。。 2013-04-14 18:50:44
TAG:酶活性的测定方法 酶活性测定 硝酸还原酶活性测定 dna聚合酶 taq dna聚合酶 dna测定 dna浓度的测定 dna聚合酶的结构 dna定量测定 hbv dna测定值
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初学者请多关照~
5楼2013-04-06 18:35:52
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fhda142

铜虫 (小有名气)
A 50 μl reaction mixture that contained 5 μl 10 ×buffer, 200 μM each of dATP, dGTP, dTTP, dCTP, 1 μCi [α-32P]dCTP, enzyme solution (1~10 μl), and 2.5ul(0.5A)salmonsperm DNA (1mg/ml)Assay reactions were incubated at 72oC for 30 min.
1 .Reactions were terminated on ice and 5-u1 aliquots spotted onto DEAE paper disks (DE-81, Whatman)

2 . Spotted discs were dried,washed three times in 2 x SSC for 5 min

3.rinsed in 100% cold ethanol,and air-dried.

4 .radioactivity was counted using a liquid scintillation counter

5 .One unit DNA polymerase is defined as the amount of polymerase that incorporates 10 nmol of labeled 4XdNTP into a DE81-bound
这是我综合几篇文献采用的方法，测了2次结果还不错~~
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6楼2013-06-28 21:03:38
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yiye1220

新虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by fhda142 at 2013-06-28 21:03:38
A 50 μl reaction mixture that contained 5 μl 10 ×buffer, 200 μM each of dATP, dGTP, dTTP, dCTP, 1 μCi dCTP, enzyme solution (1~10 μl), and 2.5ul(0.5A)salmonsperm DNA (1mg/ml)Assay reactions wer ...

您好 请问您是用液体闪烁计数器测定的taq酶活吗 没有这个仪器可不可以用其他方法做一下 期待您的回复 谢谢
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7楼2015-06-08 14:58:28
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WQS1991

银虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by zhenwuhuang at 2013-04-03 17:26:05
看看是不是这个。http://file.lw23.com/d/dc/dc7/dc73dff7-3d8b-4fea-99bb-af4c962a1b5a.pdf

方法没有了啊，能不能再上传一份呢，现在这个网址打开啥都没有啦，多谢啦！
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8楼2015-08-28 19:17:35
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