应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

CyRhmU.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » dgge最后一次分离切胶后用不带GC夹子引物扩增不出目的条带
212/3返回列表上一页123下一页
查看: 1505  |  回复: 20
只看楼主@他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

wubingqi

木虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by 小果冻524 at 2013-03-27 18:25:00
还没做过纯菌的呢...

嗯，怀疑这个不带GC夹子的引物有问题，建议用纯菌试试，或是干脆更换新的引物，别忘了阳性对照
赞一下 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

小果冻524
11楼2013-03-27 21:06:23
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

DoRbIr

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
个人感觉有核酸染料就不好扩增了，我是用的银染法。
赞一下 回复此楼
12楼2013-03-28 22:38:59
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小果冻524

新虫 (小有名气)
送鲜花一朵
引用回帖:
11楼: Originally posted by wubingqi at 2013-03-27 21:06:23
嗯，怀疑这个不带GC夹子的引物有问题，建议用纯菌试试，或是干脆更换新的引物，别忘了阳性对照...

确实是引物的问题，谢谢啦，问题已经解决了
赞一下 回复此楼
13楼2013-03-31 21:10:44
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小果冻524

新虫 (小有名气)
引用回帖:
12楼: Originally posted by DoRbIr at 2013-03-28 22:38:59
个人感觉有核酸染料就不好扩增了，我是用的银染法。

谢谢啦，是正反引物浓度不对称导致，还是谢谢啦！祝你实验顺利！
赞一下 回复此楼
14楼2013-03-31 21:12:48
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小果冻524

新虫 (小有名气)
送鲜花一朵
引用回帖:
4楼: Originally posted by taoqi1986918 at 2013-03-27 16:20:21
试一试MIX吧，可能模板中含有酶抑制剂。

谢谢，问题已经解决，是引物的问题呢
赞一下 回复此楼
15楼2013-03-31 21:13:47
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

DoRbIr

金虫 (正式写手)
引用回帖:
14楼: Originally posted by 小果冻524 at 2013-03-31 21:12:48
谢谢啦，是正反引物浓度不对称导致，还是谢谢啦！祝你实验顺利！...

这样啊，那我以后用到的时候，也应该注意一下了
赞一下 回复此楼
16楼2013-04-01 20:42:03
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

快乐酒僧

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by 小果冻524 at 2013-03-27 10:51:23
gelred染色半小时，切胶后加双蒸水50ul微震荡十来分钟，放冰箱。。
问题是提取的DNA模板也不能用不带GC的引物扩增，只要换引物就残疾...

找到问题了吗？
建议：连扩两次；或者引物也可能有问题；再者有无GC，P的条件也是要适当变化的，有调整吗？
赞一下 回复此楼
17楼2013-05-07 20:04:47
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

快乐酒僧

新虫 (小有名气)
引用回帖:
17楼: Originally posted by 快乐酒僧 at 2013-05-07 20:04:47
找到问题了吗？
建议：连扩两次；或者引物也可能有问题；再者有无GC，P的条件也是要适当变化的，有调整吗？...

不好意思，看到已经解决了。
赞一下 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

小果冻524
18楼2013-05-07 20:08:05
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小果冻524

新虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
18楼: Originally posted by 快乐酒僧 at 2013-05-07 20:08:05
不好意思，看到已经解决了。...

还是谢谢你的回复~~已经解决了，共同进步！
赞一下 回复此楼
19楼2013-05-07 21:05:55
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Rechellijuan

新虫 (小有名气)
你好  什么叫正反引物浓度不对称？我最近做DGGE割胶回收 pcr老是条带弥漫
赞一下 回复此楼
20楼2015-07-13 17:52:10
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 小果冻524 的主题更新
212/3返回列表上一页123下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭