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wubingqi

铁杆木虫 (小有名气)

引用回帖:
9楼: Originally posted by 小果冻524 at 2013-03-27 18:25:00
还没做过纯菌的呢...

嗯,怀疑这个不带GC夹子的引物有问题,建议用纯菌试试,或是干脆更换新的引物,别忘了阳性对照

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11楼2013-03-27 21:06:23
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DoRbIr

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
个人感觉有核酸染料就不好扩增了,我是用的银染法。
12楼2013-03-28 22:38:59
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小果冻524

新虫 (小有名气)

送鲜花一朵
引用回帖:
11楼: Originally posted by wubingqi at 2013-03-27 21:06:23
嗯,怀疑这个不带GC夹子的引物有问题,建议用纯菌试试,或是干脆更换新的引物,别忘了阳性对照...

确实是引物的问题,谢谢啦,问题已经解决了
13楼2013-03-31 21:10:44
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小果冻524

新虫 (小有名气)

引用回帖:
12楼: Originally posted by DoRbIr at 2013-03-28 22:38:59
个人感觉有核酸染料就不好扩增了,我是用的银染法。

谢谢啦,是正反引物浓度不对称导致,还是谢谢啦!祝你实验顺利!
14楼2013-03-31 21:12:48
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小果冻524

新虫 (小有名气)

送鲜花一朵
引用回帖:
4楼: Originally posted by taoqi1986918 at 2013-03-27 16:20:21
试一试MIX吧,可能模板中含有酶抑制剂。

谢谢,问题已经解决,是引物的问题呢
15楼2013-03-31 21:13:47
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DoRbIr

金虫 (正式写手)

引用回帖:
14楼: Originally posted by 小果冻524 at 2013-03-31 21:12:48
谢谢啦,是正反引物浓度不对称导致,还是谢谢啦!祝你实验顺利!...

这样啊,那我以后用到的时候,也应该注意一下了
16楼2013-04-01 20:42:03
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快乐酒僧

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by 小果冻524 at 2013-03-27 10:51:23
gelred染色半小时,切胶后加双蒸水50ul微震荡十来分钟,放冰箱。。
问题是提取的DNA模板也不能用不带GC的引物扩增,只要换引物就残疾...

找到问题了吗?
建议:连扩两次;或者引物也可能有问题;再者有无GC,P的条件也是要适当变化的,有调整吗?
17楼2013-05-07 20:04:47
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快乐酒僧

新虫 (小有名气)

引用回帖:
17楼: Originally posted by 快乐酒僧 at 2013-05-07 20:04:47
找到问题了吗?
建议:连扩两次;或者引物也可能有问题;再者有无GC,P的条件也是要适当变化的,有调整吗?...

不好意思,看到已经解决了。

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

18楼2013-05-07 20:08:05
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小果冻524

新虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
18楼: Originally posted by 快乐酒僧 at 2013-05-07 20:08:05
不好意思,看到已经解决了。...

还是谢谢你的回复~~已经解决了,共同进步!
19楼2013-05-07 21:05:55
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Rechellijuan

新虫 (小有名气)

你好  什么叫正反引物浓度不对称?我最近做DGGE割胶回收 pcr老是条带弥漫
20楼2015-07-13 17:52:10
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