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dgge最后一次分离切胶后用不带GC夹子引物扩增不出目的条带
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又来请教大家了。如题还是PCR扩增不出，之前用于做DGGE的pcr用B968F-GC和B1401R效果很好，长度不到500bp，现在切完胶要测序了，用B968F扩不出来了，它与B968F-GC的序列是一样的啊，为什么出不来呢？？？？？ 我试了做引物浓度梯度，模板浓度梯度，退火温度梯度，降落PCR也试过了，都不行，不带GC夹的引物几乎都扩出来了！！ 今天用DNA模板做不带GC夹子引物的扩增也出不来，我就搞不明白了，引物序列是一样的，怎么这就结合不上去了！！ 大家快帮我分析分析吧~~~~或者给我推荐几篇文献也好！跪谢啊！！！！ |
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小果冻5244楼2013-03-27 16:20:21