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yuyu2008

银虫 (小有名气)

[交流] 启动子活性降低但是其mRNA的表达水平却升高，这是怎么回事啊 已有3人参与

启动子活性降低但是其mRNA的水平升高，怎么回事啊
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1楼 2013-03-21 19:31:29
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lzh860801

金虫 (正式写手)
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调的启动子不够长 缺少一些元件
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2楼2013-03-21 21:25:08
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普通回帖

yuyu2008

银虫 (小有名气)
您好，我先给细胞转入一个基因的启动子（长度大约为1800bp）,然后用一种盐类物质处理细胞，发现其mRNA的启动活性降低，但是当我只用盐类处理细胞时其mRNA可上升4倍左右。您说的我启动子太短了，那您觉得启动活性下调这是为什么呢，至少应该没有什么变化吧，求解释，，大概一个基因的启动子多长算是比较完全一些不好意思啊，我才开始做的，很多都不懂，请指教a
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3楼2013-03-22 09:38:14
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yuyu2008

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by lzh860801 at 2013-03-21 21:25:08
调的启动子不够长 缺少一些元件

您好，我先给细胞转入一个基因的启动子（长度大约为1800bp）,然后用一种盐类物质处理细胞，发现其mRNA的启动活性降低，但是当我只用盐类处理细胞时其mRNA可上升4倍左右。您说的我启动子太短了，那您觉得启动活性下调这是为什么呢，至少应该没有什么变化吧，求解释，，大概一个基因的启动子多长算是比较完全一些不好意思啊，我才开始做的，很多都不懂，请指教a
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4楼2013-03-22 09:38:28
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yuyu2008

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by lzh860801 at 2013-03-21 21:25:08
调的启动子不够长 缺少一些元件

您好，我先给细胞转入一个基因的启动子（长度大约为1800bp）,然后用一种盐类物质处理细胞，发现其mRNA的启动活性降低，但是当我只用盐类处理细胞时其mRNA可上升4倍左右。您说的我启动子太短了，那您觉得启动活性下调这是为什么呢，至少应该没有什么变化吧，求解释，，大概一个基因的启动子多长算是比较完全一些不好意思啊，我才开始做的，很多都不懂，请指教a
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5楼2013-03-22 09:39:58
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lzh860801

金虫 (正式写手)
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5楼: Originally posted by yuyu2008 at 2013-03-22 09:39:58
您好，我先给细胞转入一个基因的启动子（长度大约为1800bp）,然后用一种盐类物质处理细胞，发现其mRNA的启动活性降低，但是当我只用盐类处理细胞时其mRNA可上升4倍左右。您说的我启动子太短了，那您觉得启动活性下 ...

可能是处理导致了细胞生长状况的变化，抑制住了一些生理活动，而你的启动子上可能整好缺失了响应这种处理的原件，导致了启动子活性的下降，换句话说就对于你的1800bp长的启动子 在这种处理时由于细胞生理状况的变化活性的确是降低的 但当再长一点的时候会有其他蛋白来调控它使它升高，具体启动子要多长 你得自己分析调控原件
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yuyu2008
6楼2013-03-22 17:00:24
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yuyu2008

银虫 (小有名气)
送鲜花一朵
引用回帖:
6楼: Originally posted by lzh860801 at 2013-03-22 17:00:24
可能是处理导致了细胞生长状况的变化，抑制住了一些生理活动，而你的启动子上可能整好缺失了响应这种处理的原件，导致了启动子活性的下降，换句话说就对于你的1800bp长的启动子 在这种处理时由于细胞生理状况的变化 ...

谢谢您的分析，我再试着将启动子克隆长一些，看有什么变化
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7楼2013-03-23 00:18:17
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gmrice

金虫 (正式写手)
★
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我师兄是做启动子的，一般基本的启动子活性七八百bp就可以，2K左右的长度是一般的启动子长度（水稻中）所以你这种现象是怎么测定启动子活性的呢？
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8楼2013-03-28 15:17:40
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yuyu2008

银虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by gmrice at 2013-03-28 15:17:40
我师兄是做启动子的，一般基本的启动子活性七八百bp就可以，2K左右的长度是一般的启动子长度（水稻中）所以你这种现象是怎么测定启动子活性的呢？

我是将启动子连在载体上用荧光素酶的强弱来检测启动子的活性的
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9楼2013-03-28 23:00:57
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gmrice

金虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
很多启动子的研究都是在载体上连接一个GUS基因，然后染色看表达量跟表达部位，但是只要你能确定确实是表达量测定的是正确的就行，你的出现的问题我觉得如果正如你所说，那恭喜你，你有了个好材料
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10楼2013-03-30 08:53:38
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